| 研究課題/領域番号 |
17K11241
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| 研究機関 | 長崎大学 |
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研究代表者 |
三浦 清徳 長崎大学, 医歯薬学総合研究科(医学系), 准教授 (00363490)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | 胎盤機能 / 間葉系幹細胞 / エクソソーム / microRNA |
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| 研究実績の概要 |
1)産科疾患と関連した胎盤由来間葉系幹細胞（MSC）における胎盤特異的microRNAプロファイルの同定
胎盤組織の各部位からMSCを初代培養し、妊娠関連microRNAの発現解析および胎盤由来MSCにおけるその調節機構について検討した。胎盤組織から培養した絨毛膜板(CP)-MSC、絨毛(CV)-MSCならびに脱落膜(DB)-MSCのいずれにおいても、MSCの細胞表面マーカー（CD44、CD73、CD90、CD105）が陽性かつ造血幹細胞の表面マーカー（CD34、CD45）が陰性でありMSCの定義を満たしていることを確認した。そして、妊娠関連microRNA （miR-517a、miR-518bおよびmiR-323-3p）の発現比はDB-MSCと比較してCP-MSCおよびCV-MSCにおいてそれぞれ有意に高かった（CP-MSC or CV-MSC vs DB-MSC、Mann-Whitney U test、p<0.001）。miR-518bを過剰発現したCV―MSCのマイクロアレイ解析を行い、妊娠高血圧腎症や胎児発育不全との関与が報告されている遺伝子として、miR-518bによって発現上昇する候補遺伝子（CD69、HPX、SERPINB2、LPA、TNSF10、STC1）および発現低下する候補遺伝子（TH、HSD3B1、EDNRA、AGER、WNT2、C9、TRPM2）を同定した。
2)母体血漿中エクソソームの胎盤特異的microRNA・RNA発現プロファイル解析
母胎血漿中のエクソソームよりRNAを抽出した。そして、母体血漿中エクソソームにおけるchromosome 19 microRNA cluster（C19MC）領域のmicroRNA(miR-515-3p, -517a, -517c, -518b) およびC14MC領域のmiR-323-3pの発現を確認した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
平成29年度は、当該年度の研究計画にある1）産科疾患と関連した胎盤由来間葉系幹細胞（MSC）における胎盤特異的microRNAプロファイルの同定、および2)母体血漿中エクソソームの胎盤特異的microRNA・RNA発現プロファイル解析を実施した。母体血漿中エクソソームのRNAマイクロアレイ解析以外は、当初の研究計画通りに順調に進展し、研究成果を公表することができた。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成30年度は、以下の2項目について検討する。
1）胎盤由来MSCにおける胎盤特異的microRNAの標的遺伝子を同定する：疾患病態と関連した母体血漿中エクソソームの胎盤特異的microRNAのmimicあるいはinhibitorをMSCに導入して、それらの標的遺伝子を同定する。
2）妊娠経過に伴う母体血漿中エクソソームにおけるRNA発現プロファイルの基準値を決定する。：正常妊婦を対象として、妊娠12週前後、妊娠24週前後、妊娠37週前後および分娩後24時間の母体血漿中エクソソームにおける胎盤特異的microRNA発現量ならびにRNAプロファイルを定量解析し、妊娠経過に伴う基準値を設定する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
母胎血漿中エクソソームのRNAプロファイルを決定するためのマイクロアレイ解析を今年度に実施しなかったため、次年度使用額が生じた。平成30年度にエクソソームのRNAマイクロアレイ解析を実施する予定であり、次年度使用額は計画通りに使用される。
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