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2021 年度 実績報告書

癌特異的プロモーターと磁性ナノ粒子を応用した婦人科癌における末梢血中腫瘍細胞解析

研究課題

研究課題/領域番号 17K11270
研究機関金沢医科大学

研究代表者

高倉 正博  金沢医科大学, 医学部, 教授 (20313661)

研究分担者 前之園 信也  北陸先端科学技術大学院大学, 先端科学技術研究科, 教授 (00323535)
研究期間 (年度) 2017-04-01 – 2022-03-31
キーワード末梢血中腫瘍細胞 / テロメラーゼ
研究実績の概要

末梢血中腫瘍細胞(circulating tumor cells: CTC)は癌の新規バイオマーカーとして、またliquid biopsyの手段として注目を集めているが、その検出方法や応用法はいまだに発展途上である。現在主流の細胞膜表面抗原に頼った検出方法では様々に姿を変える癌細胞を捉えきれていないのが現状である。我々は癌の不死化能に着目し、不死化関連酵素であるテロメラーゼの活性化を指標として癌細胞を検出・分離するシステムを構築することを目標とする。さらに磁性ナノ粒子を応用して従来は困難であった生細胞の回収・解析を可能とすることも目的とした。これまでにCTC検出システム構築のためにhTERTプロモーター下流にβ-integrin膜貫通ドメインと人工タグタンパク質であるHalo tagの融合タンパクを発現するようにデザインしたプラスミドを作成し、対象細胞にエレクトロポレーション法で導入する系を確立した。これによってhTERTプロモーターが活性化されている細胞では細胞膜上にタグ蛋白が発現される(Surface Tag-protein expressed in tumor cells: STET)。さらにSurvivinプロモーターを用いたSurvin-STETも作成しhTERT-STETと併用することでテロメラーゼ低発現あるいは陰性細胞にも対応できるように改善を施した。正常血液に培養癌細胞を一定数混入させたCTCモデル検体に対して行ったCTC検出実験ではHaloTagリガンド化蛍光プローブを用いて行った検出感度は約90%に向上した。一方でCTCの回収に関してはHalo tagリガンド化磁性体を用いた実験では回収率は20%程度と低率であり今後さらに改善を要するものと思われた。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2022 2021

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 1件)

  • [雑誌論文] Determination of human papillomavirus type in archival tissue specimens of invasive cervical cancer using molecular mapping and E6/E7-based polymerase chain reaction2022

    • 著者名/発表者名
      Sakamoto Jinichi、Saito Mayumi、Zhang Shitai、Takakura Masahiro、Takagi Hiroaki、Sasagawa Toshiyuki
    • 雑誌名

      PLOS ONE

      巻: 17 ページ: 0265996~0265996

    • DOI

      10.1371/journal.pone.0265996

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] Comparison of Aptima and hybrid capture‐2 HPV tests and Pap test in the referral population in Japan2021

    • 著者名/発表者名
      Kuroki Hiroko、Sakamoto Jinichi、Shibata Takeo、Takakura Masahiro、Sasagawa Toshiyuki
    • 雑誌名

      Journal of Medical Virology

      巻: 93 ページ: 5076~5083

    • DOI

      10.1002/jmv.26865

    • 査読あり

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公開日: 2022-12-28  

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