| 研究課題/領域番号 |
17K11354
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
菊田 周 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (00555865)
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| 研究分担者 |
近藤 健二 東京大学, 医学部附属病院, 准教授 (40334370)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | 嗅上皮 / 細胞死 |
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| 研究実績の概要 |
インスリン産生が低下した糖尿病マウスを用いて、嗅上皮障害後の再生過程を観察した。
各時間経過後（メチマゾール障害後3、7、14、28日）に脳をパラホルムアルデヒドで還流固定し、5μmの厚みで嗅上皮冠状断を作製し、嗅上皮の厚み、嗅細胞数を糖尿病マウスと正常マウスで比較した。インスリンは膵臓β細胞から産生されるため、このβ細胞を選択的に破壊するストレプトゾトシンをC57BL/6マウス（10週齢♂）に投与し糖尿病マウスを作成した。ストレプトゾトシンを120㎎/ｋｇを3日間腹腔内に投与すると、投与したマウスの80％近くでⅠ型糖尿病マウスの基準となる空腹時血糖250㎎/ｄｌ以上を達成できた。次に糖尿病マウスあるいは正常マウス（コントロール）に対して、嗅毒性物質であるメチマゾール75mg/kgを腹腔内に投与した。メチマゾールで嗅上皮を障害すると、数日で新生嗅細胞が再生、分化し、障害後7-14日で成熟嗅細胞が出現し始め、障害後28日には、嗅細胞数、嗅上皮の厚み、成熟嗅細胞数が、障害前のレベルにまで回復していた。しかし糖尿病マウスでは、障害後14日以降で、インスリン分泌が正常なコントロールマウスと比較して嗅上皮が薄く、嗅細胞数が減少していた。さらに成熟嗅細胞の指標となるOlfactory marker protein(OMP) 陽性細胞数もコントロールマウスと比較して有意に減少していた。以上の実験を通して、新生嗅細胞は、インスリンシグナルに依存して再生・成熟することを確認した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
計画通りに研究は行われ、予想通りの研究結果が得られている。
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| 今後の研究の推進方策 |
今後、以下の2点を証明するために当初予定した計画通りに実験を進める。
１．嗅上皮障害後の新生細胞の機能代償は、インスリンシグナルが低下した糖尿病マウスにおいて破綻する。
２．適切な時期にインスリンシグナルを受けないと、新生嗅細胞は成熟せずに細胞死に陥る。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
当初想定していた以上に進展することができた実験系があった。特に嗅上皮での免疫染色では、少ない試薬数で十分な実験結果が得られ、試薬の購入費用を抑えることができたため。
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