新たな実験系を用いた視細胞死のメカニズムの解明とその阻止

2020 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K11448
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 辻川 元一 大阪大学, 医学系研究科, 教授 (70419472)
• 研究分担者: 松下 賢治 大阪大学, 医学系研究科, 講師 (40437405)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2021-03-31
• キーワード: 網膜色素変性 / 加齢黄斑変性 / 視細胞死 / HTRA1 / EYS

研究実績の概要

我々はZebrafishをモデルとして眼疾患の病態の研究を行っている。本課題においては先進国での失明の第一位の原因である加齢黄斑変性の強力な疾患感受性遺
伝子HTRA1が視細胞死を引き起こすメカニズムについて明らかにしてきた。本疾患の疾患感受性変異や加齢といった発症要因が、このHTRA1の発現の亢進を引き起
こし、これが視細胞死を引き起こすこと。そして、この発現亢進により、ヒト加齢黄斑変性と同様の表現型を示すこと示した。
本年度に於いては示された視細胞死が実際に問題となる新生血管の発生に関与するかを検討した。今年度においてはRh1::HTRA1トランスジェニックにおいてはVEGFだけでなく、VEGFR1,R2を含めたVEGFシグナルの分子の多くが、視細胞死を引き起こす前に、発言が上昇していることを示した。
このようなHTR1の広範な視細胞における機能をさらに同定するため、CRISPR/Cas9系によりHTRA1のノックアウト体の作出を行い、G0を多数得て、現在ノックアウト体のLineの確立を行っている。
さらに、遺伝子材質性が強い、失明に至る重要疾患（難病で最も多いもののひとつである）網膜色素変性について、日本人にての変異が多い（約全体の２０％）Eysについて、モルフォリのノックダウン体を用いて、EYSがシリアに局在する点、おそらく、タンパクの輸送に関与することで、ノックアウト体では視細胞での視物質の局在が乱れること、日本人にお言いG843Eミスセンス変異においても、このヒト変異EYSを発現させてもノックアウト体でのこの表現型が回復されないこと（野生型のEYSでは表現型は回復する）から、このミスセンス変異がハイポモルフィックアレルであり、日本人での病態変異であることを示した。これについては、さらにノックアウト体を作成することで、臨床学的研究も行っていく

研究成果

• [雑誌論文] A hypomorphic variant in EYS detected by genome-wide association study contributes toward retinitis pigmentosa (2021)
  • 著者名/発表者名: Nishiguchi K, Miya F, Mori Y, Fujita K, Akiyama M、,,,,,,,,Tsujikawa Motokazu、et. al.
  • 雑誌名: Communications Biology 巻: 4 ページ: 0
  • DOI: 10.1038/s42003-021-01662-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association of the CAV1 ‐ CAV2 locus with normal‐tension glaucoma in Chinese and Japanese (2020)
  • 著者名/発表者名: Lu Shi Yao、Rong Shi Song、Wu Zhenggen、Huang Chukai、Matsushita Kenji、Ng Tsz Kin、Leung Christopher K.S.、Kawashima Rumi、Usui Shinichi、Tam Pancy O.S.、Tsujikawa Motokazu、Young Alvin L.、Zhang Mingzhi、Wiggs Janey L.、Nishida Kohji、Tham Clement C.、Pang Chi Pui、Chen Li Jia
  • 雑誌名: Clinical & Experimental Ophthalmology 巻: 48 ページ: 658～665
  • DOI: 10.1111/ceo.13744
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Novel mutation identified in Leber congenital amaurosis - a case report (2020)
  • 著者名/発表者名: Sato Shigeru、Morimoto Takeshi、Tanaka Sayaka、Hotta Kikuko、Fujikado Takashi、Tsujikawa Motokazu、Nishida Kohji
  • 雑誌名: BMC Ophthalmology 巻: 20 ページ: 1
  • DOI: 10.1186/s12886-020-01577-9
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Corneal Opacity Induced by Light in a Mouse Model of Gelatinous Drop-Like Corneal Dystrophy (2020)
  • 著者名/発表者名: Nagahara Yukiko、Tsujikawa Motokazu、Koto Ryota、Uesugi Koji、Sato Shigeru、Kawasaki Satoshi、Maruyama Kazuichi、Nishida Kohji
  • 雑誌名: The American Journal of Pathology 巻: 190 ページ: 2330～2342
  • DOI: 10.1016/j.ajpath.2020.08.017
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Quantitative Analysis of the Association Between Follow-Up Duration and Severity of Limbal Stem Cell Deficiency or Visual Acuity in Aniridia (2020)
  • 著者名/発表者名: Komoto Shimpei、Oie Yoshinori、Kawasaki Satoshi、Kawasaki Ryo、Nishida Nozomi、Soma Takeshi、Koh Shizuka、Maruyama Kazuichi、Usui Shinichi、Matsushita Kenji、Tsujikawa Motokazu、Maeda Naoyuki、Nishida Kohji
  • 雑誌名: Investigative Opthalmology & Visual Science 巻: 61 ページ: 57～57
  • DOI: 10.1167/iovs.61.6.57
• [学会発表] フックス角膜内皮ジストロフィ患者のTCF4遺伝子におけるCTGリピート伸長解析 (2021)
  • 著者名/発表者名: 小藤良太、大家義則、西田希、辻川元一、中森雅之、西田幸二
  • 学会等名: 角膜カンファレンス2021