| 研究課題/領域番号 |
17K11521
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| 研究機関 | 順天堂大学 |
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研究代表者 |
田中 奈々 順天堂大学, 医学部, 准教授 (50530656)
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| 研究分担者 |
浦尾 正彦 順天堂大学, 医学部, 講師 (00213504)
宮原 克 順天堂大学, 医学(系)研究科(研究院), 技術員 (00420844)
藤原 なほ 順天堂大学, 医学部, 助教 (20589543)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | ヒルシュスプルング病 / 腸管神経系 / 細胞外マトリックス / ラミニン |
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| 研究実績の概要 |
まず、腸管神経のみが蛍光発色するSOX10-VENUSマウスと、エンドセリンレセプターＢ欠乏マウスを交配し、新しいヒルシュスプルング病（ＨＤ）モデルマウスを作製した。
次に、ラミニンのＨＤ腸管における発現を、免疫染色とＩＳＨにて調査した。胎生13.5日の腸管（中腸、近位後腸、遠位後腸）におけるラミニン－１の発現を免疫染色にて比較すると、すべての部位において、コントロールと比べ、ＨＤマウスの無神経節腸管におけるラミニン-１の発現が高いことが示された。
続けて、ＨＤ腸管における、ラミニンの神経伸長効果について調べた。申請者らは以前、正常腸管において、ラミニン添加により無添加の腸管より有意に腸管神経系の発達が促進されることをすでに示したが、今回のＨＤ腸管では、その結果とは異なり、ラミニン添加による、神経発達効果は認められなかった。免疫染色にてＨＤマウスの無神経節腸管におけるラミニン-1の発現が高かった結果を踏まえると、ＨＤ腸管において、ラミニンの利用障害がある可能性が示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
初年度には、ラミニンの局在を免疫染色及びＩＳＨにて調べる予定であったが、ＩＳＨのセットアップや条件設定に時間がかかり、免疫染色のみにとどまった。そのため、次年度以降に行う予定であった、ラミニンのＨＤ腸管における効果を調べる実験を行った。
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| 今後の研究の推進方策 |
初年度の実験において、ヒルシュスプルング病腸管におけるラミニンの利用障害が示唆されたため、利用障害の原因として、ラミニンのレセプターであるインテングリンに着目し、ヒルシュスプルング病腸管におけるインテグリンの発現を調査することとした。ＨＤ腸管の部位別、ステージ別に、免疫染色およびPCRにてインテグリンの発現を調査する。
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