| 研究課題/領域番号 |
17K11704
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| 研究機関 | 大阪大学 |
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研究代表者 |
高橋 雄介 大阪大学, 歯学部附属病院, 講師 (60397693)
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| 研究分担者 |
石本 卓也 大阪大学, 工学研究科, 准教授 (50508835)
岡本 基岐 大阪大学, 歯学部附属病院, 医員 (60755354)
小道 俊吾 大阪大学, 歯学部附属病院, 医員 (40804456)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | 歯学 / 覆髄 / 歯髄 / バイオインフォマティクス / 創傷治癒 |
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| 研究実績の概要 |
平成29年度の研究実施計画に基づき、象牙質-歯髄複合体の創傷治癒を促進するタンパクの機能ドメインの分類、検索ならびにラットを用いた動物実験系にて覆髄実験をおこなった。
1．これまで一連の研究においてわれわれが見出した、歯髄の創傷治癒を促進する効果をもつ可能性があるタンパクである、Tissue Inhibitor of Metalloproteinase 1 (TIMP1)、Prolactin-inducible Protein （PIP）、Junction Plakoglobin (JUP)およびS100-A7の全長構造を維持したまま、もしくはMMP20で酵素処理した各種タンパク分解産物を覆髄剤として用いた直接覆髄実験をラットを用いた動物実験系にて実施し、高解像度マイクロCTおよび病理組織学的手法にて形成される第三象牙質についての評価をおこなった。その結果、PIPをMMP20にて分解したものを覆髄剤として用いた場合に最も早期かつ良質で欠損のない第三象牙質の形成が誘導されることが明らかとなった。
2．実験１で得られた候補タンパクのPIPのMMP20による分解産物のどの領域が歯髄の創傷治癒を促進しているのかを明らかにするために、高速液体クロマトグラフィーを用いて、PIPとPIP分解産物の分析をおこない、得られた結果からピークの位置、形態、強度などを比較検討し、そのピーク部分をフラクションコレクターにて回収し、現在はその部分の構造解析をおこなっている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
歯髄創傷治癒促進作用を持つタンパクの機能ドメイン部位検索のためにおこなった動物実験において、候補タンパクの中からターゲットを絞ることが可能となった。これにより、フォーカスされた分子をターゲットとした高速液体クロマトグラフィー解析ならびにその後の構造解析へと研究計画は順調に進捗している。
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| 今後の研究の推進方策 |
平成30年度は、高速液体クロマトグラフィーを用いた解析ならびにその後の構造解析を引き続きおこなう予定である。また、候補タンパクが歯髄のどのような分子と相互作用を生じ、創傷治癒を促進しているのかを明らかにするため、質量分析分子イメージングを用いた方法にて解析もおこなう予定である。これらの実験ならびにデータベース検索から、歯髄創傷治癒を促進するペプチド構造の決定を目指して実験を遂行予定である。
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