| 研究課題/領域番号 |
17K11829
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| 研究機関 | 新潟大学 |
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研究代表者 |
川崎 真依子 新潟大学, 医歯学系, 助教 (40584587)
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| 研究分担者 |
前田 健康 新潟大学, 医歯学系, 教授 (40183941)
大峡 淳 新潟大学, 医歯学系, 教授 (40266169)
川崎 勝盛 新潟大学, 医歯学総合病院, その他 (40529640)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | 口蓋裂 / 一次繊毛 / OFD1 |
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| 研究実績の概要 |
口蓋裂は、ヒトにおける先天異常の中で最も頻度の高い疾患の一つであり、この高い発症率は「生体の中で口蓋形成が、分子レベル、環境レベルでの変異に最も敏感な構造体」であることを示している。
口顔指症候群 I 型（Oral-facial-digital syndrome, type I）は、口腔、顔面、手指に先天異常を呈する繊毛病の一つとされる疾患で、この症候群の患者には、口蓋裂を始めとする顎顔面領域の奇形が認められる。近年、その原因遺伝子として一次繊毛構成タンパクのOFD1 が発見された。
本研究は、このOfd1の欠損マウスを用いて、口蓋形成メカニズムの解明を目指す。Ofd1は、中心小体や一次繊毛の基底小体に局在するため、ほぼ全ての細胞に存在する。そこで、Cre-LoxPシステムを利用してOfd1の組織特異的欠損マウスを作成・検索することにより、どの部位のOfd1が口蓋形成に重要かを検索した。
Keratin(K)14Creを交配して作成したOfd1の上皮特異的欠損マウスであるOfd1fl/fl;K14Creマウスに口蓋裂は認められなかった。Osr2CreまたはWnt1Creを交配して作成したOfd1の間葉特異的欠損マウスであるOfd1fl/fl;Osr2Creマウス、Ofd1fl/fl;Wnt1Creマウスには口蓋裂が確認された。これらにより、間葉のOfd1が、口蓋形成に必須であることが明らかとなった。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
Ofd1は性染色体状にあるためOfd1fl/flマウスやCreとのコンパウンドマウスを作成するのに手間がかかることに加え、母親マウスの飼育放棄や食殺行為のため、各組織特異的欠損マウスが予定していた数に達するまで、予定していたよりも多くの時間を要し、実験の進捗に大きく影響した。繁殖の規模を増やすことにより、十分な数のマウスをすでに確保しており、今後は予定通りの研究遂行が可能と思われる。
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| 今後の研究の推進方策 |
次年度は、口蓋裂の認められたOfd1fl/fl;Osr2Creマウス、Ofd1fl/fl;Wnt1Creマウスにおける分子変動をマイクロアレイ、in situ hybridization, 免疫染色などで検索する。特に、器官発生に重要な役割を担うことが知られているShh, Fgf, Wnt, Tgfなどのシグナル経路の活性の検索には注意を払う。またMeox2, Shox2, Pax9, Msx1, Osr2などの口蓋形成関連遺伝子の発現も確認する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
口蓋裂の認められたOfd1fl/fl;Osr2Creマウス、Ofd1fl/fl;Wnt1Creマウスにおける分子変動をマイクロアレイ、in situ hybridization, 免疫染色、などで検索する。助成金は、試薬・抗血清、実験動物・飼料、遺伝子工学用器具とその試薬、器官培養器具とその試薬、マイクロアレイの分析料に使う予定である。
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