| 研究課題/領域番号 |
17K11938
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| 研究機関 | 徳島大学 |
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研究代表者 |
川合 暢彦 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 講師 (40437588)
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| 研究分担者 |
二川 健 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(医学域), 教授 (20263824)
田中 栄二 徳島大学, 大学院医歯薬学研究部(歯学域), 教授 (40273693)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | 骨格筋萎縮 / ユビキチン-プロテアソーム経路 / IGF-1シグナル / Cbl-b / 機能性ペプチド |
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| 研究実績の概要 |
本研究はユビキチン-プロテアソーム系制御による廃用性筋萎縮の治療法開発を目的としている。これまで、ユビキチンリガーゼCbl-bによるIGF-1シグナルの減弱が廃用性筋萎縮の原因であることを見出し、筋萎縮抑制を目的としてCbl-bを競合阻害する抗ユビキチン化ペプチドを作製した。本Cbl-b阻害ペプチドの投与実験により個体レベルでの筋萎縮抑制効果を検討し、本ペプチドによる廃用性筋萎縮に対する新規治療法の確立を目指す。本年度は、本ペプチドを静脈内投与により安定して作用部位まで送達するための投与条件を決定することを目的とし以下の研究を行った。
7週齢のC57BL/6野生型雄性マウスを使用し、ペプチドにFITCを付与したアテロコラーゲン複合体の投与実験を行った。ペプチド/アテロコラーゲン複合体を眼窩静脈叢から投与を行い24時間後に前頚骨筋を摘出し、蛍光顕微鏡により検索を行ったが筋肉中に抗ユビキチン化ペプチドを確認することができなかった。さらに同条件にて摘出した前頚骨筋を抗FITC抗体により免疫組織化学染色を行ったが、筋肉中にペプチドを検出することができなかった。本年度での結果からは眼窩静脈叢からの静脈内投与によりペプチドを筋まで送達することは困難であると考えられた。そのため次年度は、尾静脈からの投与を試みるなど再度投与条件の検討を行う。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
初年度の目標は本ペプチドを静脈内投与により安定して作用部位まで送達するための投与条件を決定することである。そのため、デリバリー担体としてアテロコラーゲンを使用し、ペプチド/アテロコラーゲン複合体として眼窩静脈叢から投与を行った。しかし、後肢の筋においてペプチドは検出されず、眼窩静脈叢からの静脈内投与によりペプチドを筋まで送達するに至らなかった。今後は投与部位の他、投与するペプチド量およびペプチドとアテロコラーゲン比率の検討を行う必要がある。
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| 今後の研究の推進方策 |
次年度は、本ペプチドを尾静脈から投与し再度投与条件の検討を行う。その際、複数のペプチドとアテロコラーゲンの比率を使用し最適な投与条件の確立を目指す。投与条件の確立が行えた後、7週齢のC57BL/6野生型雄性マウスを用いて対照群、投与群、非投与群を設定し、筋萎縮モデルとして投与群と非投与群に座骨神経切除術を行う。投与群にはペプチド/アテロコラーゲン複合体の投与を行い、手術9日後に前頚骨筋を摘出し本ペプチドによる抗筋萎縮効果について検討を行う。
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