高齢者の気管支液フローラの構成と機能、口腔との関連：メタゲノム、メタボローム解析

2021 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K12006
• 研究機関: 新潟大学
• 研究代表者: 佐藤 拓一 新潟大学, 医歯学系, 教授 (10303132)
• 研究分担者: 鷲尾 純平 東北大学, 歯学研究科, 講師 (20400260) ; 河村 好章 愛知学院大学, 薬学部, 教授 (80262757) ; 星川 康 藤田医科大学, 医学部, 教授 (90333814) ; 真柳 弦 東北大学, 歯学研究科, 講師 (10451600) ; 高橋 一郎 九州大学, 歯学研究院, 教授 (70241643) ; 加藤 一夫 愛知学院大学, 歯学部, 准教授 (60183266)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2022-03-31
• キーワード: 歯学 / 細菌 / 分類学 / 微生物

研究実績の概要

本研究では、高齢者（肺癌症例）の不顕性誤嚥について、種々の上気道防御反射の観点と気管支液中の細菌叢との関連を探求し、高齢者の不顕性誤嚥の詳細ならびに誤嚥性肺炎との関連について明らかにした。口腔や咽頭部からの微生物混入を避けられるマイクロサンプリングプローブを用いて、気管支液を採取し、気管支液の微生物量の定量ならびに質的解析を行い、上気道防御反射の低下程度と比較した。実験条件の検討および実験設備のセットアップを行い、試料中の細菌叢の質的・量的解析を行った。試料処理および培養に必須の、嫌気グローブボックスを導入した。試料を嫌気グローブボックスに搬入し、種々の試料処理を施し、最適な処理方法を探索した。その後、細菌培養をCDC血液寒天平板上で、嫌気的に行い、細菌量（CFUs）を求めた。その後の、試料中の細菌構成の解析（質的解析）については、嫌気培養後の各コロニーを純培養（sub-culture、pure-culture）後、genomic DNAを抽出し、細菌特有の遺伝子領域である、16S ribosomal RNAをターゲットとしたPCR・シークエンス解析によって、各菌種の同定を行った。

研究成果

• [雑誌論文] Profiling system of oral microbiota utilizing polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism analysis (2021)
  • 著者名/発表者名: Sano H, Wakui A, Kawachi M, Washio J, Abiko Y, Mayanagi G, Yamaki K, Tanaka K, Takahashi N, Sato T
  • 雑誌名: Journal of Oral Biosciences 巻: 63 ページ: 292～297
  • DOI: 10.1016/j.job.2021.05.003
  • 査読あり
• [雑誌論文] Bacterial concentration and composition in liquid baby formula and a baby drink consumed with an artificial nipple (2021)
  • 著者名/発表者名: Wakui A, Sano H, Kawachi M, Aida A, Takenaka Y, Yonezawa A, Nakahata N, Moriyama S, Nishikata M, Washio J, Abiko Y, Mayanagi G, Yamaki K, Sakashita R, Tanaka K, Takahashi N, Sato T
  • 雑誌名: Journal of Oral Biosciences 巻: 63 ページ: 161～168
  • DOI: 10.1016/j.job.2021.03.001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Profiling of microbiota at the mouth of bottles and in remaining tea after drinking directly from plastic bottles of tea (2021)
  • 著者名/発表者名: Wakui A*, Sano H*, Hirabuki Y*, Kawachi M, Aida A, Washio J, Abiko Y, Mayanagi G, Yamaki K, Tanaka K, Takahashi N, Sato T
  • 雑誌名: Dentistry Journal 巻: 9 ページ: 58～58
  • DOI: 10.3390/dj9060058
  • 査読あり / オープンアクセス
• [学会発表] Profiling of microbiota in liquid baby formula and a baby drink consumed with an artificial nipple (2022)
  • 著者名/発表者名: Wakui A, Kawachi M, Nishikata M, Washio J, Abiko Y, Mayanagi G, Takahashi N, Sato T
  • 学会等名: International Symposium for IOHS (Interface Oral Health Science) 2022
  • 国際学会
• [学会発表] Profiling of microbiota in sport-drink and orange juice after drinking directly from plastic bottles (2022)
  • 著者名/発表者名: Kawachi M, Wakui A, Washio J, Abiko Y, Mayanagi G, Takahashi N, Sato T
  • 学会等名: International Symposium for IOHS (Interface Oral Health Science) 2022
  • 国際学会
• [学会発表] Profiling of microbiota in various drinks after drinking directly from plastic bottles (2021)
  • 著者名/発表者名: Kawachi M, Takahashi N, Kaku N, Higuchi M, Wakui A, Washio J, Takahashi N, Sato T
  • 学会等名: The 63rd Annual Meeting of Japanese Association for Oral Biology
• [学会発表] The composition and structure of oral microbiome: 16S rRNA gene analysis on saliva, plaque, infected root canals obtained from a patient (2021)
  • 著者名/発表者名: Yamaki K, Washio J, Tamahara T, Sato T
  • 学会等名: The 69th Annual Meeting of Japanese Association for Dental Research
  • 国際学会