非小細胞肺癌における新規バイオマーカーの同定と機能解析

2019 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 17K15009
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 野口 智史 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (60732807)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2020-03-31
• キーワード: 非小細胞肺癌 / バイオマーカー

研究実績の概要

本研究では、理化学研究所により開発されたCAGE（Cap Analysis of Gene Expression）法による遺伝子発現解析により、肺癌の新規バイオマーカーを探索した。非小細胞肺癌細胞株と正常気道・肺胞上皮細胞のcDNAマイクロアレイデータおよびCAGEデータベースを統合し、肺癌細胞株で有意に発現が上昇している遺伝子をリストアップした。その中で、actin cytoskeletonと相互作用するアダプター分子として機能するCRIP1に注目した。
CRIP1高発現株のH358、H1437において、siRNAによりCRIP1発現をノックダウンすると、細胞増殖が抑制された。colony formation assayではノックダウン群でコロニー形成が抑制される傾向があった。細胞周期解析、アポトーシス解析では有意差はなかった。組織マイクロアレイを用いたCRIP1の免疫染色では、高発現群は低発現群と比較し、予後が不良な傾向にあった。以上より、CRIP1は一部の肺癌に特異的に発現し、細胞増殖に関与するが、強いoncogenic functionは有していないことが示唆された。
次にTCGAデータベースを用いて、肺腺癌の転移に関わる新規遺伝子探索を行った。正常肺と比較し肺癌組織で遺伝子発現が上昇し、かつリンパ節/遠隔転移群でも発現が上昇している遺伝子群を抽出した。その中で、Rhoファミリー低分子G蛋白RhoVに着目した。公共データベースのメタ解析では、RhoVが高発現だと予後が有意に不良であった。肺癌細胞株A549、H23において、RhoV遺伝子をノックダウンすると増殖能・遊走能が低下する傾向にあった。一方レンチウイルスベクターにより正常気管支上皮細胞BEAS2Bに同遺伝子を強制発現させたが、増殖能・遊走能は変化がなかった。今後組織マイクロアレイでの免疫染色を検討している。

研究成果

• [雑誌論文] Active mTOR in Lung Epithelium Promotes Epithelial-Mesenchymal Transition and Enhances Lung Fibrosis (2020)
  • 著者名/発表者名: Saito M, Mitani A, Ishimori T, Miyashita N, Isago H, Mikami Y, Noguchi S, Tarui M, Nagase T.
  • 雑誌名: American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology 巻: - ページ: -
  • DOI: 10.1165/rcmb.2019-0255OC
  • 査読あり
• [雑誌論文] CISH is a negative regulator of IL-13-induced CCL26 production in lung fibroblasts (2019)
  • 著者名/発表者名: Takeshima H, Horie M, Mikami Y, Makita K, Miyashita N, Matsuzaki H, Noguchi S, Urushiyama H, Hiraishi Y, Mitani A, Borok Z, Nagase T, Yamauchi Y.
  • 雑誌名: Allergology International 巻: 68 ページ: 101～109
  • DOI: 10.1016/j.alit.2018.08.005
  • 査読あり
• [雑誌論文] Naftopidil reduced the proliferation of lung fibroblasts and bleomycin‐induced lung fibrosis in mice (2019)
  • 著者名/発表者名: Urushiyama H, Terasaki Y, Nagasaka S, Kokuho N, Endo Y, Terasaki M, Kunugi S, Makita K, Isago H, Hosoki K, Souma K, Ishii T, Matsuzaki H, Hiraishi Y, Mikami Y, Noguchi S, Tamiya H, Mitani A, Yamauchi Y, Shimizu A, Nagase T.
  • 雑誌名: Journal of Cellular and Molecular Medicine 巻: 23 ページ: 3563～3571
  • DOI: 10.1111/jcmm.14255
  • 査読あり