|
ゴルジ体ストレス応答とは、ゴルジ体の処理能力を超える事態に対して、能力を増強することで恒常性を維持する、細胞の生命活動に必須の適応機構である。我々はN型糖鎖修飾酵素の発現制御を行うストレス応答経路を明らかにしたが、ゴルジ体ではプロテオグリカン型糖鎖修飾など、N型糖鎖修飾とは異なる修飾過程を経るものがあることから、複数のストレス応答経路の存在が推察された。そこで本研究では、ゴルジ体で特異的に起こるプロテオグリカン型糖鎖修飾に焦点を当て、その修飾能力を増強させるストレス応答機構を解明することを目的とした。
プロテオグリカンの糖鎖修飾能力低下を誘導するために、プロテオグリカンのコアタンパク質の過剰発現または阻害剤xyloside処理を行ったHeLa細胞を観察したところ、それぞれについてゴルジ体の断片化がみられた。次に次世代シークエンサーを用いてxyloside処理細胞の網羅的遺伝子発現解析を行ったところ、複数のプロテオグリカン型糖鎖修飾酵素遺伝子の発現上昇がみられた。これら遺伝子群についてプロモーター解析を行い、同定した各エンハンサー配列を比較すると、GGGGCGGGGというコンセンサス配列が存在することが判明した。また、GLCEには上記のコンセンサス配列以外にTTTTACAATTGGTCという別のエンハンサー配列が転写制御に寄与することが明らかとなった。そこで、これらのエンハンサー配列をPGSE-A及びPGSE-Bと命名した。以上の結果から、プロテオグリカン型糖鎖修飾能力を増強する新規転写制御配列の同定に成功した。
|
