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2019 年度 実績報告書

ポプラ分化中木部におけるコニフェリン輸送体の同定

研究課題

研究課題/領域番号 17K15296
研究機関宮崎大学

研究代表者

津山 濯  宮崎大学, 農学部, 助教 (40786183)

研究期間 (年度) 2017-04-01 – 2020-03-31
キーワードトランスポーター / コニフェリン / p-グルコクマリルアルコール / リグニン / 木化
研究実績の概要

木質バイオマスの有効活用を目指し、リグニンの生合成に関して多くの研究がなされてきたが、樹木分化中木部におけるリグニン前駆物質の細胞内から細胞外への輸送メカニズムについては、未だ概略すら明らかになっていない。これまでコニフェリルアルコールの配糖体であるコニフェリンのATP依存的輸送活性が広く木本植物に存在することを明らかにしてきたが、コニフェリンがどこにどのように輸送され、木化に用いられるかは明らかではない。そこで木本植物におけるリグニン生合成メカニズムの解明に寄与することを目的として、ポプラ分化中木部におけるコニフェリン輸送体の同定を目指した。
ポプラ分化中木部の組織を採取し、コニフェリン輸送活性の高いミクロソーム膜画分をプロテオーム解析して、34の候補タンパク質を絞り込むことに成功した。ポプラ分化中木部から全RNAを抽出し、逆転写反応によりcDNAを作製した。候補遺伝子のコーディング領域を得てクローニング後、塩基配列を確認した。植物での過剰発現用バイナリーベクターpGWB605に候補遺伝子を挿入し、組換えアグロバクテリウムを作製後、タバコBY-2細胞に感染させ、機能解析を目指した。
さらに、モウソウチク当年稈からミクロソーム膜画分を調製しリグニン前駆物質の輸送活性を求めたところ、コニフェリンとp-グルコクマリルアルコールの輸送活性が見られた。これらの輸送メカニズムは、V-ATPaseとH+勾配が関与するものであり、これはポプラおよびヒノキにおける輸送メカニズムと同一であった。これらのことから、針葉樹、広葉樹、および単子葉類の木化組織において、コニフェリンおよびp-グルコクマリルアルコールの輸送メカニズムが保存されていることが示唆される。幅広い植物種の木化組織に、相同性の高いコニフェリン輸送体、およびp-グルコクマリルアルコール輸送体が存在している可能性がある。

  • 研究成果

    (8件)

すべて 2020 2019

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 1件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (6件) (うち国際学会 1件)

  • [雑誌論文] Proton gradient-dependent transport of p-glucocoumaryl alcohol in differentiating xylem of woody plants.2019

    • 著者名/発表者名
      Tsuyama Taku, Matsushita Yasuyuki, Fukushima Kazuhiko, Takabe Keiji, Yazaki Kazufumi, Kamei Ichiro
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 9 ページ: 8900

    • DOI

      https://doi.org/10.1038/s41598-019-45394-7

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] 樹木分化中木部におけるリグニン前駆物質の輸送2019

    • 著者名/発表者名
      津山 濯
    • 雑誌名

      アグリバイオ

      巻: 3 ページ: 63-65

  • [学会発表] ポプラ分化中木部におけるコニフェリン輸送体の探索2020

    • 著者名/発表者名
      津山 濯、大塚 環、矢野陽花、島田菜津美、雉子谷佳男、榊原陽一、矢崎一史、高部圭司、亀井一郎
    • 学会等名
      第70回日本木材学会大会
  • [学会発表] タケ当年稈におけるリグニン前駆物質の輸送メカニズム2020

    • 著者名/発表者名
      島田菜津美、津山 濯、雉子谷佳男、松下泰幸、福島和彦、矢崎一史、高部圭司、亀井一郎
    • 学会等名
      第70回日本木材学会大会
  • [学会発表] モウソウチク当年稈由来ミクロソーム膜画分におけるコニフェリンおよびp-グルコクマリルアルコールの輸送2019

    • 著者名/発表者名
      島田 菜津美、津山 濯、松下 泰幸、福島 和彦、矢崎 一史、高部 圭司、亀井 一郎
    • 学会等名
      第26回日本木材学会九州支部大会
  • [学会発表] プロテオーム解析によるポプラ分化中木部におけるコニフェリン輸送体候補の絞り込み2019

    • 著者名/発表者名
      津山 濯,榊原陽一,矢崎一史,高部圭司,亀井一郎
    • 学会等名
      日本プロテオーム学会2019年大会・第70回日本電気泳動学会
  • [学会発表] モウソウチク当年稈由来ミクロソーム膜画分におけるリグニン前駆物質の輸送2019

    • 著者名/発表者名
      島田 菜津美、津山 濯、松下 泰幸、福島 和彦、矢崎 一史、高部 圭司、亀井 一郎
    • 学会等名
      第14回トランスポーター研究会
  • [学会発表] Transport Activities of Coniferin and p-Glucocoumaryl Alcohol in Lignifying Tissues2019

    • 著者名/発表者名
      Taku Tsuyama, Yasuyuki Matsushita, Kazuhiko Fukushima, Nobukazu Shitan, Kazufumi Yazaki, Keiji Takabe, Ichiro Kamei
    • 学会等名
      15th Cell Wall Meeting
    • 国際学会

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公開日: 2021-01-27  

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