新規ゲムシタビン耐性機構の研究

2017 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 17K15648
• 研究機関: 奈良県立医科大学
• 研究代表者: 谷 里奈 奈良県立医科大学, 医学部, 助教 (20783872)
• 研究期間 (年度): 2017-04-01 – 2019-03-31
• キーワード: MAST4 / ゲムシタビン / 薬剤耐性 / 膵癌 / AKT

研究実績の概要

申請者は、gemcitabine(GEM)に対する耐性機序について検討を行うため、ヒト膵管癌細胞株MIA-PaCa-2(MIA-P)に低濃度でGEMを持続処理することで、GEM耐性の細胞株MIA-Gを樹立した。MIA-GのGEMに対するIC50は、MIA-Pと比較し約1000倍の差が認められた。MIA-PとMIA-G間で遺伝子プロファイルを比較すると、Microtubule-associated serine/threonine kinase 4(MAST4)の発現は約6倍亢進しており、MAST4のノックダウンによりMIA-GのGEM耐性はMIA-Pと同程度まで低下した。膵管癌臨床検体91症例を用いた免疫染色では、MAST4は正常膵管上皮では細胞質に、膵管癌細胞では細胞質と核に発現しており、核への染色性は予後と逆相関を示していた。MIA-Gにおいて、MIA-Pに比較し細胞質・核ともにMAST4タンパクレベルの亢進が認められた。さらに、MIA-GではAKT3の発現亢進が見られ、MAST4ノックダウンによりAKT3レベルも低下した。臨床材料を用い、MAST4発現を91例の膵管癌で検討すると、45例49%に高発現が見られ、発現の程度は、T因子、N因子、M因子、予後不良と相関していた。さらに、GEM投与例では、MAST4高発現例で有意に予後は不良であった。さらに、ネオアジュバントの効果を検討すると、GEM高発現例ではGEMに対し効果不良が見られたのに対し、5-FU系薬剤には明らかな耐性は認められなかった。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

MAST4結合タンパクに対する質量分析は実施中である。

今後の研究の推進方策

MAST4結合タンパクを質量分析-プロテオミクス解析により解明するとともに、MAST4-ChiPアッセイによりMAST4の核内におけるDNA結合性とその標的を解析する。

研究成果

• [雑誌論文] Intermittent calorie restriction enhances epithelial-mesenchymal transition through alteration of energy metabolism in a mouse tumor model. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kusuoka O, Fujiwara-Tani R, Nakashima C, Fujii K, Ohmori H, Mori T, Kishi S, Miyagawa Y, Goto K, Kawahara I, Kuniyasu H
  • 雑誌名: Int J Oncol 52 巻: 52 ページ: 413-423
  • DOI: 10.3892/ijo.2017.4229
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Expression of cytosolic malic enzyme (ME1) is associated with disease progression in human oral squamous cell carcinoma. (2018)
  • 著者名/発表者名: Nakashima C, Yamamoto K, Fujiwara-Tani R, Luo Y, Matsushima S, Fujii K, Ohmori H, Sasahira T, Sasaki T, Kitadai Y, Kirita T, Kuniyasu H
  • 雑誌名: Cancer Sci 巻: 109 ページ: 2036-2045
  • DOI: 10.1111/cas.13594
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Pro-metastatic signaling of elaidic acid, a trans fatty acid, is associated with lipid rafts. (2018)
  • 著者名/発表者名: Kishi S, Fujiwara-Tani R, Luo Y, Kawahara I, Goto K, Fujii K, Ohmori H, Nakashima C, Sasaki T, Kuniyasu H
  • 雑誌名: Oncol Lett 巻: 15 ページ: 4423-4426
  • DOI: 10.3892/ol.2018.7817
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Expression of the long-chain fatty acid receptor GPR40 was associated with cancer progression in colorectal cancer. (2018)
  • 著者名/発表者名: Nakashima C, Kishi S, Fujiwara-Tani R, Luo Y, Kawahara I, Goto K, Fujii K, Ohmori H, Kuniyasu H
  • 雑誌名: Oncol Lett 15(6): , 2018 巻: 15 ページ: 8641-8646
  • DOI: 10.3892/ol.2018.8383
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Pro-metastatic intracellular signaling of elaidic acid, a trans fatty acid. (2017)
  • 著者名/発表者名: Fujii K, Luo Y, Nishiguchi Y, Fujiwara R, Kishi S, He S, Yang S, Sasaki T, Ohmori H, Kuniyasu H
  • 雑誌名: Int J Oncol 巻: 50 ページ: 85-92
  • DOI: 10.3892/ijo.2016.3797
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Elaidic acid, a trans fatty acid, enhances the metastasis of colorectal cancer cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Ohmori H, Fujii K, Kadochi Y, Mori S, Nishiguchi Y, Fujiwara R, Kishi S, Sasaki T, Kuniyasu H
  • 雑誌名: Pathobiol 巻: 84 ページ: 144-151
  • DOI: 10.1159/000449205
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fatty acids inhibit anti-cancer effect of 5-fluorouracil in mouse cancer cell lines. (2017)
  • 著者名/発表者名: Tanabe E, Kitayoshi M, Fujii K, Ohmori H, Luo Y, Fujiwara R, Kadochi Y, Mori S, Kuniyasu H*.
  • 雑誌名: Oncol Lett 巻: 14 ページ: 681-686
  • DOI: 10.3892/ol.2017.6190
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Proton pump inhibitor induces-collagen expression in colonocytes is associated with collagenous colitis. (2017)
  • 著者名/発表者名: Mori S, Kadochi Y, Luo Y, Fujiwara-Tani R, Nishiguchi Y, Kishi S, Fujii K, Ohmori H, Kuniyasu H*
  • 雑誌名: World J Gastroentrol 巻: 23 ページ: 1586-1593
  • DOI: 10.3748/wjg.v23.i9.1586
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Remodeling of energy metabolism by a ketone body and medium-chain fatty acid suppressed proliferation of CT26 mouse colon cancer cells. (2017)
  • 著者名/発表者名: Kadochi Y, Mori S, Fujiwara-Tani R, Luo Y, Nishiguchi Y, Kishi S, Fujii K, Ohmori H, Kuniyasu H*
  • 雑誌名: Oncol Lett 巻: 14 ページ: 673-680
  • DOI: 10.3892/ol.2017.6195
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Fatty acids induce stemness in the stromal cells of a CT26 mouse tumor model (2017)
  • 著者名/発表者名: Kawahara I, Mori T, Goto K, Fujii K, Ohmori H, Fujiwara-Tani R, Kuniyasu H
  • 雑誌名: Pathobiol 巻: 84 ページ: 237-242
  • DOI: 10.1159/000471854
  • 査読あり
• [学会発表] MAST4は膵癌における新規ゲムシタビン耐性遺伝子である (2017)
  • 著者名/発表者名: 谷 里奈、佐々木隆光、岸 真五、羅 奕、國安弘基
  • 学会等名: 第106回日本病理学会総会、東京都
• [学会発表] 膵癌における新規ゲムシタビン耐性遺伝子であるMAST4の作用機序 (2017)
  • 著者名/発表者名: 谷 里奈、佐々木隆光、羅 奕、國安弘基
  • 学会等名: 第26回日本癌転移学会、大阪市
• [学会発表] Gemcitabine resistance of MIA-PaCa-2 human pancreatic duct carcinoma cells (2017)
  • 著者名/発表者名: Fujiwara-Tani R, Mori S, Kishi S, Sasaki T, Kuniyasu H
  • 学会等名: 76th Annual Meeting of Japanese Association for Cancer, Yokohama
• [学会発表] 膵癌における新規ゲムシタビン耐性遺伝子であるMAST4の作用機序 (2017)
  • 著者名/発表者名: 谷 里奈、佐々木隆光、森 汐莉、岸 真吾、國安弘基
  • 学会等名: 第28回日本消化器癌発生学会・第9回国際消化器癌発生会議、熊本市