| 研究課題/領域番号 |
17K15708
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| 研究機関 | 国立感染症研究所 |
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研究代表者 |
竹内 潤子 (柴田潤子) 国立感染症研究所, ウイルス第二部, 日本学術振興会特別研究員RPD (80647488)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2021-03-31
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| キーワード | ウィルス / B型肝炎ウイルス / HBV |
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| 研究実績の概要 |
最近、申請者らは数学と実験を融合したアプローチにより、ヒト免疫不全ウイルス感染におけるcell-to-cell 感染の寄与率を明らかにした（Iwami and Takeuchi et al. eLife 2015）。一方、B 型肝炎ウイルス（HBV）に関しては、これまで簡便で効率的な感染許容細胞株が存在しなかったことからcell-to-cell 感染様式に関する詳細な研究報告はない。本研究では、HBV 感染許容細胞（標的細胞）およびHBV 粒子放出細胞（ドナー細胞）を用いて、HBV のcell-to-cell 感染機構を明らかにする。また、所属研究室で同定された様々なHBV 侵入阻害剤がcell-free 感染だけでなく、cell-to-cell 感染をも標的としているかを解析し、薬効を定量評価することでcell-to-cell 感染の意義も明らかにする。
今年度は、HBV cell-to-cell 感染のみが生じる実験系を構築し、その結果、HBV はcell-to-cell 感染で拡がる可能性が示唆された。以下にその実験方法の詳細を述べる。ドナー細胞と標的細胞を11日間共培養した。通常のHBV 感染実験ではcell-free 感染とcell-to-cell 感染が混在した状態にある。そこで、培養液中にHBV 中和抗体を添加し続けることによりcell-free 感染を阻止し、cell-to-cell 感染のみが生じる実験系を構築した。HBV 中和抗体を添加した培地、つまりcell-to-cell 感染のみが生じる条件下のドナー細胞と標的細胞を抗HBV 抗原抗体で染色しflow cytometry で解析した結果、HBV におけるcell-to-cell 感染の可能性が示唆された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
当初の計画通り、HBV cell-to-cell 感染のみが生じる実験系を確立し、その結果、HBV cell-to-cell 感染が起こっている可能性が示唆された。しかしながら、出産・育児のため平成29年12月より研究を中断したため、平成29年度に実施予定であったHBV cell-to-cell 感染に関わる宿主領域の特定ができなかった。なお、平成30年5月より「研究再開準備支援期間」を利用して研究を再開している。
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| 今後の研究の推進方策 |
産前産後の休暇または育児休業の取得に伴う補助事業期間の延長を申請する予定である。
平成30年度は「HBV cell-to-cell 感染に関わる宿主領域の特定」を実施し、平成31年度は「HBV cell-to-cell 感染に対する薬剤感受性試験」に取り組む予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
平成29年12月より出産・育児のため研究を中断したため、消耗品の購入や、成果発表のための国内外旅費の支出予定が一部変更になった。なお、平成30年5月より「研究再開準備支援期間」を利用して研究を再開している。
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