| 研究課題/領域番号 |
17K15913
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| 研究機関 | 旭川医科大学 |
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研究代表者 |
後藤 拓磨 旭川医科大学, 医学部, 助教 (50646007)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | microRNA / RNA結合蛋白 |
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| 研究実績の概要 |
複数のRNA結合蛋白（RBP）関連遺伝子をsiRNAでKnock downすることで，膵癌細胞株および膵管内乳頭粘液性腫瘍（IPMN）細胞株において増殖を抑制するRBPを3種類同定した．この3種類のRBPのうち，膵癌で最も高度に増殖を抑制するRBPも明らかとした．またこの3種類のRBPのKnock downにて，癌細胞中の2種類の腫瘍関連microRNA (miR)の発現が低下し，逆にExosome中で発現が亢進する傾向を明らかにした．さらに最も増殖を抑制するRBPのKnock downでは，癌細胞中の腫瘍抑制miRの発現が亢進し，逆にExosome中では発現が低下していることもわかった．その他，RBPと細胞中およびExosome中のmiRの動態を解析中である．さらに上記RBPの2種類のKnock downにて他のRBPの細胞中およびExosome中のmRNAが変化していることも確認された．RBP同士の相互作用についてもRT-PCRおよびウエスタンブロッドなどにて解析をすすめている．
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
膵腫瘍の増殖に関連する候補RBPを同定し，それによるmicroRNAやExosomeとの相互作用の解析を進めているため
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| 今後の研究の推進方策 |
候補RBP全てにおいて細胞とExosome中のmicroRNAの動態を明らかにする．
候補RBPによるInvasion/migrationへの影響を明らかにする．
またRBP同士の相互作用についてもRT-PCRやウエスタンブロッドによる解析にて明らかにする．
Exosomeの分泌を抑制した際の候補RBPやmicroRNAの変化を解析し，腫瘍進展に関わる影響を明らかにする．
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| 次年度使用額が生じた理由 |
当初より3年間での使用計画である．
候補のRNA結合蛋白（RBP）を過剰発現または発現抑制した細胞よりExosomeを抽出し，他の細胞へ処置した際の増殖能や遊走能などの変化を解析する．
候補RBPの腫瘍組織中と血清Exosomeでの発現を確認し，microRNAの発現変化や悪性度との関連を解析する．
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