| 研究実績の概要 |
前年度までの結果より，バルプロ酸（VPA）胎内曝露が生後大脳皮質内に分布するアストロサイト数を増加させることが判明した．これらの過剰産生されたアストロサイトの機能を解析するため，今年度は予定を変更し，生後の大脳皮質内に分布するアストロサイト分画を精製しRNAseqを実施した．
まず，Anti-Glutamate aspartate transporter（GLAST） Microbead法により精製されたアストロサイト分画と精製前の神経系細胞分画についてGLASTをコードするSLC1A3の発現量をqPCRで比較したところ，アストロサイト分画では精製前の神経系細胞分画と比較してSLC1A3発現量が5倍に増加した．このことは本手法がアストロサイトを精製するために有効な方法であることを示した．
次に，VPA胎内曝露が生後アストロサイトの遺伝子発現に与える影響を解析するため，アストロサイト分画からトータルRNAを抽出し，RNAseqを実施した．VPA胎内曝露群では対照群と比較して28遺伝子に発現量の変動を認めた．具体的には，ヒストン結合タンパクやATPaseをコードする遺伝子などについて発現量増加を認めた．さらに，これらの変動についてgene ontology（GO）解析を行ったところ，VPA胎内曝露群では対照群と比較してADP合成経路が促進されるとの結果を得た（ADP biosynthetic process, GOid: 0006172, n = 3, p < 0.01）．
本研究の結果は，VPA胎内曝露が生後早期の大脳皮質に分布するアストロサイトの遺伝子発現を変動させるとともにアストロサイト数を増加させることを示した．過剰産生されたアストロサイトではATPase量が増加すると推測され，生体活動によるエネルギー需要が増加している可能性が考えられた．VPA胎内曝露が仔の高次脳機能を障害することは多数の先行研究が報告しており，本研究の結果はアストロサイトの数の増加や生体活動の変動が高次脳機能障害の一因となり得る可能性を示唆した．
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