| 研究実績の概要 |
前年度に引き続き、ラット肝細胞癌モデルでの解析を行った。N1S1細胞をラット肝臓に移植し、1週間後に軽カ テーテル的動脈塞栓術を施行した。塞栓術施行48時間後にサクリファイスを行い、癌病変部を含めた肝検体を摘出し、RT-PCRにてTGF-β1および HIF-1α、αSMA,CollagenのmRNA発現量を測定した。これら4項目すべてで、Sham群と比較し塞栓術施行群にて有意にmRNA発現上昇が見られた。前年度に評価した免疫染色やELISAによるTGF-β1タンパク質発現亢進を示した結果と同様であり、これらを後押しする結果であった。
これらの結果が。1）肝動脈塞栓術による低酸素が影響しているのか、あるいはマクロファージ等の炎症細胞が関与しているのかを調べるため、さらに 2）TGF-β1および HIF-1αそれぞれの発現の関係を調べるために、In vitro studyを行った。ラット肝細胞癌(N1S1)を48時間低酸素培養し、HIF-1aブロッカーを用いて低酸素培養下でのHIF-1a発現を抑えた上で、TGF-β1の発現量を検討した。この条件下では、TGF-b1の発現が有意に抑制された。 また、外因性にTGF-β1を加えることで、HIF-1αの上昇が得られることがわかった。これらの結果より、TGF-β1および HIF-1αの発現は低酸素によるものと思われるが、それぞれが共依存性に作用し合っている可能性が推察された。
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