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・LSRの下流シグナルと脂質の関連の検討
これまでLSRのリガンドとしてリポタンクの一つであるVLDLを投与し、LSR陽性細胞に対するその増殖促進効果を検証してきたが、LSR陽性細胞が必要とする脂質分子を明らかにするために複数の脂肪酸を投与した。アラキドン酸、ミリスチン酸、パルミチン酸は
LSR陽性細胞の増殖を促進しなかったが、オレイン酸 (OA) とエライジン酸 (EA)は増殖を促進した。続いてLSR siRNAを卵巣癌細胞株に導入し、LSRをノックダウンした細胞を作成し、これにOAとEAを投与した。その結果OAはLSRノックダウン後もLSR陽性細胞の増殖を促進したが、EAは促進しなかった。このことからEAはLSRを介して細胞増殖を促進することが判明した。その経路としてはEAによるATP産生の増加が考えられる。EA投与後にLSR陽性細胞内の脂質を蛍光色素で染色すると、EA投与により細胞内脂質が増加した。さらにEA投与後に細胞内ATP値を測定すると、EAによりATP産生が増加していた。以上からEA投与により細胞内脂質が増加し、β酸化、TCAサイクル、電子伝達系の活性化を経てATP産生が増加し、細胞増殖につながると考えられた。また卵巣癌の臨床的な特徴として腹膜播種があるが、EAが卵巣癌細胞の遊走を促進することを発見した。
・LSRと増殖の関係
上記の様に、LSRは脂肪分子を細胞内に取り込み、そのエネルギーを増殖や遊走に利用しているが、さらに詳細なメカニズム探索のために、LSR陽性細胞にLSRに特異的なsiRNAを導入しLSRノックアウト株を作成した。この細胞からタンパクを抽出しウェスタンブロット法にてタンパクの発現変動を検証すると、MAPKが抑制されていることが判明した。現在、関連する他のタンパクの発現を確認中であるが、LSRはMAPKを介して増殖に関連している可能性がある。
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