2017 年度実施状況報告書

血管内皮細胞の異常性の獲得に対し低酸素環境が及ぼす影響に関する研究

研究課題

研究課題/領域番号	17K17101
研究機関	北海道大学
研究代表者	近藤美弥子北海道大学, 歯学研究院, 助教 (10631864)
研究期間 (年度)	2017-04-01 – 2020-03-31
キーワード	低酸素 / 血管内皮細胞 / 遺伝子
研究実績の概要	腫瘍組織は過剰な脂肪の増殖と不十分な血管新生により低酸素環境に陥っている。腫瘍細胞は低酸素環境において、細胞死の回避、薬剤抵抗性や新順応、転移能の亢進などを獲得する可能性が明らかになってきた、一方、申請者はこれまでに、腫瘍内では腫瘍血管です他低酸素に曝される場合があることを見出した。腫瘍血管内皮細胞は染色体異常など、正常血管内皮細胞との間に性質の違いがあることが知られている。我々はこれまでに通常酸素分圧下において高栄養の血管内皮細胞を用いて、腫瘍組織から腫瘍血管内皮細胞の分離、培養を行い　その異常性、特異性を確認してきた。さらに我々はすでに、低酸素環境が正常血管内皮細胞に対して、染色体の異常性の獲得を誘発する可能性を見いだしている、また、その機序において低酸素環境において産生される、活性酸素種（ROS）が重要な役割を果たしている可能性も示唆してきた。以上を踏まえ、低酸素条件における正常血管内皮細胞の挙動について検討を行った。 1)低酸素培養条件においての細胞の表現型の解析：血管内皮細胞の増殖能、遊走能、細胞の接着能、未分化能の維持、幹細胞性の獲得の有無、薬剤耐性の有無、染色体異常性の獲得の有無などを解析した。 2)表現型の変化に伴う遺伝子発現の変化の解析による腫瘍血管内皮マーカー候補分子の探索：低酸素培養条件による正常血管内皮細胞の遺伝子発現変化を解析する。発現が亢進、あるいは低下した分子に関して、Real time PCR法で確認を行った。
現在までの達成度 (区分)	現在までの達成度 (区分) 2: おおむね順調に進展している理由該当年次の研究目的である、酸素培養条件においての細胞の表現型の解析、並びに表現型の変化に伴う遺伝子発現の変化の解析による腫瘍血管内皮マーカー候補分子の探索について検討し、まとめることができた。
今後の研究の推進方策	当初の予定どおり引き続き、低酸素環境における血管内皮細胞の挙動について検討する。また、低酸素における活性酸素の関わりを検討する。また、研究協力先のスタッフとも継続的にディスカッションを行い、実験や研究計画の検討、再計画を行っていく。
次年度使用額が生じた理由	（理由）今年度は次年度以降に向けての準備段階の研究内容となった。研究のまとめや、内容の検討や関連する研究調査の期間が長かった。そのため、発表する機会が少なくなり当初の予定より少ない支出の範囲にとどまる結果となった。（使用計画）次年度は今年度の結果を踏まえ、さらに解析を進める。研究内容から特殊や試薬を必要とするため、引き続き支出が大きくなることが予想される。また、研究発表の機会も増えるため旅費などの支出が増えると思われる。