| 研究課題/領域番号 |
17K17118
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
山本 弥生子 東京医科歯科大学, 大学院医歯学総合研究科, 非常勤講師 (50732749)
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| 研究期間 (年度) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| キーワード | HMGB1 / 非感染性 / 歯髄炎 / DAMPs / 炎症性メディエーター / マウスマクロファージ / マウス歯乳頭細胞 / ヒト歯髄細胞 |
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| 研究実績の概要 |
歯髄炎は主にう蝕に継発し、細菌感染によって誘発される生体防御反応がその主体であるが、う蝕に継発しない歯髄炎も存在する。咬合性外傷、矯正治療、バーといった歯科用機材による切削の後に発症する歯髄炎は、細菌感染ではなく物理的侵襲が原因と考えられているがその発症メカニズムはいまだ不明である。HMGB1はDamage-Associated Molecular Patterns（DAMPs）等の刺激により細胞より放出されるおおよそ215残基のタンパク質で、動脈硬化、間接リウマチなどの非感染性の炎症疾患との関連が報告されている。本研究の目的は、歯髄炎におけるHMGB1の役割を明らかにすることである。平成29年度において、壊死歯髄細胞より放出されるHMGB1の作用を検討する目的で、マウスマクロファージ様株細胞であるRAW264.7に不死化したマウス歯乳頭細胞の壊死細胞上清（NCS）を添加した。NCSは、マウス歯乳頭細胞の凍結融解を3回繰り返した後遠心して作成した。RAW264.7にNCSを添加後、2、6、12時間後にmRNAを抽出し、炎症性サイトカイン発現を定量的RT-PCRおよびELISAで検討した。2および12時間後においてIL1α、IL1β、IL6のmRNA発現の増加が認められた。また、IL6産生は6、12時間で産生量の増加が確認された。さらに、ヒト歯髄細胞のNCSで検討したところ、ほぼ同様の結果が得られた。以上の結果から歯髄細胞のNCSがマクロファージの炎症性サイトカイン産生を誘導することが明らかになり、歯髄細胞の壊死に伴い放出されるHMGB1が歯髄炎を惹起する、あるいは修飾している可能性が推察された。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
炎症性メディエータ産生におけるHMGB1の直接的な作用の解明ができていない。
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| 今後の研究の推進方策 |
マウス歯乳頭細胞およびヒト歯髄細胞のNCSにおけるHMGB1発現量の検討およびHMGB1によるマウス歯乳頭細胞およびヒト歯髄細胞からの炎症性メディエーター産生について検討する。また、実際に熱刺激などによる非感染性炎症をラットあるいはマウス歯髄に惹起し、HMGB1発現を検討する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
HMGB1の直接的な機能解析およびin vivoにおけるHMGB1発現の解析が進まず、そのために計上した経費を次年度に繰り越したため、次年度使用額が生じた。
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