| 研究課題/領域番号 |
17K19188
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| 研究機関 | 北海道大学 |
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研究代表者 |
門出 健次 北海道大学, 先端生命科学研究院, 教授 (40210207)
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| 研究分担者 |
村井 勇太 北海道大学, 先端生命科学研究院, 助教 (20707038)
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| 研究期間 (年度) |
2017-06-30 – 2020-03-31
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| キーワード | バイオマーカー / スフィンゴシン / セラミド / 異常取り込み / ライブラリー |
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| 研究実績の概要 |
天然には20 種のアミノ酸が存在するが、現在、生体内より確認されているスフィンゴシンはL-セリン、L-アラニン及びL-グリシンから生合成されたもののみが知られている。微量分析用の標準物質として、まず、中性アミノ酸を頭部に有するスフィンゴシン類の合成を実施した。また、その立体化学としては、天然体であるL-アミノ酸を基本とした。
L-フェニルアラニンを出発原料として、保護基を導入した後、メチルリン酸部分を導入、1-テトラデカナールとのHoner-Wadsworth-Emmons 反応を実施し、二重結合を生成させた。二重結合の幾何異性についてはNMRからトランスであると判断された。次に、カルボニル基の選択的1,2還元を実施した。還元試薬、反応条件の検討を行い、選択的還元条件を見出すことに成功した。尚、還元の際の立体化学については、NMRのカップリングコンスタントから判断した。最後に脱保護により目的のファニルアラニン置換型スフィンゴシンの合成に成功した。また、脱保護直前に二重結合の還元を実施することにより、スフィンガニンを合成可能であることを確認した。更に、L-アラニン、L-トリプトファン、L-ロイシンを出発原料として、ほぼ、同様なルートで対応する頭部置換型スフィンゴシンの合成を達成することができた。
次にセラミドライブラリーの構築をめざし、スフィンゴ塩基類のコンビナトリアル的アシル化の反応条件の検討を行った。樹脂にアシル化剤を反応させたものを調整し、スフィンゴシン類のアシル化の条件検討を実施した。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
既に、L-セリンをはじめとし、L-アラニン、L-フェニルアラニン、L-トリプトファン、L-ロイシンを出発原料とした5種の頭部アミノ酸置換型スフィンゴシンの合成に成功している。また、学会発表等の外部発表も実施、良好な応答を得ている。
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| 今後の研究の推進方策 |
当初の計画に沿って、下記のような実施項目を推進する予定である。
１）中性アミノ酸を用いた頭部アミノ酸置換型スフィンゴシンの合成
保護基が必要とされる、システイン、メチオニン、プロリン、チロシン、スレオニンを出発原料とする頭部アミノ酸置換型スフィンゴシンの合成ルートの確立を行う。特に、システイン、プロリン等の官能基を有するアミノ酸についての官能基に関する保護基の検討を実施するとともに、保護後の反応性に注意して合成ルートの確立を実施する。また、L-セリン、L-アラニンに関しては、その立体化学に注目して、L-セリン、L-アラニンを出発原料としたスフィンゴシンの合成を実施する。また、得らえた鏡像体スフィンゴシンに関しての、立体化学解析法の確立を試みる。微量分析を念頭において、蛍光ラベル後のキラルカラムにより効率的な光学分離条件の検討を行う。
２）質量分析による生体内中のアミノ酸置換型スフィンゴシンの探索
本項目については、生化学者との共同研究が望ましいので、標準サンプルの合成を待って、共同研究先との打合せを行う。
３）頭部アミノ酸置換型スフィンゴシンの多様化 新規頭部アミノ酸置換型スフィンゴシン類は様々なカルボン酸により、セラミドに変換可能である。新規セラミドライブラリーの構築を目的として、簡便アシル化の予備実験を実施する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
初年度に購入したスクリュー管などの器具が、予定より安く購入できたため、経費を削減することができた。
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