研究実績の概要 |
鳥インフルエンザウイルスがヒトーヒト間で効率的に空気伝播するために重要なことはHAがヒト型レセプターを認識できるようになることだけではなく、HAが鳥型レセプターを認識しなくなることであると考えられている。これは鳥型レセプターが豊富に結合しているムチンがヒトの上部気道に多く存在しており、鳥インフルエンザウイルスを吸着することで感染を阻害するためである。またHAの物理的な安定性も重要である。今後どのようなウイルスがどのような変異を獲得すればパンデミックを起こすようになるかはわかっていない。したがって現時点ではパンデミックの発生を予想することは困難である。そこで本研究では、ヒト型レセプターを認識しかつ鳥型レセプターを認識しない、そして安定性が高くなるような鳥インフルエンザウイルス由来HAの変異を同定することで、空気伝播性獲得に必要な条件を決定することを目的とする。本研究では安全性を考慮して、PB2遺伝子を持たない制限増殖型ウイルスを用いる。 本年度はガラクトースとα2,3結合したシアル酸を末端に持つ糖鎖(Siaα2,3Gal)およびガラクトースとα2,6結合したシアル酸を末端に持つ糖鎖(Siaα2,6Gal)をノックアウトしたMDCK細胞をCRISPR/Cas9システムを用いて作製した。Siaα2,3Galノックアウトのためにシアル酸転移酵素6種類を、Siaα2,6Galノックアウトのためにシアル酸転移酵素2種類をノックアウトし、シークエンスでゲノムDNAにin/delが入っていることを確認した。今後はまずこの細胞の性状を解析する。
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