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2017 年度 実施状況報告書

原子間力顕微鏡を用いた発生胚メカニクスの網羅解析法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 17K19367
研究機関北海道大学

研究代表者

岡嶋 孝治  北海道大学, 情報科学研究科, 教授 (70280998)

研究期間 (年度) 2017-06-30 – 2019-03-31
キーワード生物物理 / 細胞
研究実績の概要

受精卵の胚形成のメカニズムの理解には、細胞の力学特性(メカニクス)の解明が不可欠である。細胞メカニクスは張力と弾性率に大別される。発生胚の張力の直接測定はなされてきたが、弾性率の測定は測定法の欠如により皆無であった。本研究では、初期発生胚全領域の細胞レオロジー計測が可能な原子間力顕微鏡(AFM)システムの開発を目的とする。広範囲測定が可能なAFMに高速動的弾性率計測法を導入し、マイクロ加工基板を用いて多数の初期発生胚の細胞力学特性の網羅測定法を構築した。フォトレジスト材質を用いたマイクロ加工基板を開発した。また、初期発生胚の静的弾性率(ヤング率)の広範囲測定に成功し、動物極と植物極の力学特性の違いを詳細に明らかにした。特に、アクチン線維、微小管、ミオシンと弾性率との関係を調べた。その結果、初期発生過程における発生胚の弾性率変化はアクチン線維とミオシン(アクトミオシンの形成)に密接に関係していることが分かった。さらに、AFMを用いて初期胚の力学測定をする場合、サンプルの表面形状に弾性率値が影響することが分かった。この問題を解決するために、表面形状に依存した力学解析モデルを提案し、そのモデルの妥当性を実験的に示した。これにより、初期発生胚の弾性率の絶対値を評価することが可能になった。これらの成果は、現在論文投稿準備中である。上記成果を踏まえて、現在、様々な方向で基板に接着した初期胚を配列させて、多数の初期胚をAFMで計測することを試みている。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

発生胚メカニクスを計測するための原子間力顕微鏡の開発は順調に進んでいる。また、発生胚を配列する種々のマイクロ加工基板の開発も順調に進んでいる。さらに、原子間力顕微鏡により広範囲の発生胚のメカニクス挙動の計測に成功した。以上のように、本研究は順調に進展している。

今後の研究の推進方策

本研究は、初期発生胚全領域の細胞レオロジー計測が可能な原子間力顕微鏡(AFM)システムの開発を目的とする。広範囲測定が可能なAFMに高速動的弾性率計測法を導入し、マイクロ
加工基板を用いて多数の初期発生胚の細胞レオロジーの網羅的タイムラプス計測を行うことを目指している。そして、データベースと画像解析から発生胚を構成する全細胞の動的弾性率像を再構成し、初期発生胚メカニクスの時空間変動を解明することを目的としている。よって、研究の推進方策は当初予定から変更ない。

次年度使用額が生じた理由

生体サンプル調製用の試薬の購入費用である。試薬はできるだけフレッシュなものが良い。次年度はじめに生体サンプル調製を再開するため次年度に使用することにした。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2018 2017

すべて 学会発表 (3件) (うち国際学会 1件)

  • [学会発表] Spatiotemporal change in cell stiffness during early embryogenesis investigated by atomic force microscopy2018

    • 著者名/発表者名
      Y.Fujii, T. Imai, W. Koizumi, K. Hotta, K. Oka, and T.Okajima
    • 学会等名
      62nd Annual Meeting Biophysical Society
  • [学会発表] Quantifying elastic modulus of soft samples with tilting angle by atomic force microscopy2017

    • 著者名/発表者名
      Y.Fujii and T.Okajima
    • 学会等名
      25th International Colloquium on Scanning Probe Microscopy
    • 国際学会
  • [学会発表] 初期胚発生過程における細胞弾性率と細胞骨格構造の時空間変動2017

    • 著者名/発表者名
      藤井 裕紀、今井 太一,小泉 航, 堀田 耕司, 岡 浩太郎, 岡嶋 孝治
    • 学会等名
      第55回日本生物物理学会大会

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公開日: 2018-12-17  

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