| 研究課題/領域番号 |
17K19600
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| 研究機関 | 広島大学 |
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研究代表者 |
望月 慎史 広島大学, 医歯薬保健学研究科(医), 助教 (90349473)
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| 研究分担者 |
小林 正夫 広島大学, 医歯薬保健学研究科(医), 名誉教授 (00162016)
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| 研究期間 (年度) |
2017-06-30 – 2020-03-31
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| キーワード | 白血病発症機序 / 先天性骨髄不全症候群 / iPS細胞 / 小児がん |
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| 研究実績の概要 |
本研究では、重症先天性好中球減少症、Fanconi貧血などの先天性骨髄不全症候群（CBMFS）患者体細胞から樹立されたiPS細胞から分化誘導された造血/血液細胞に、白血病関連遺伝子変異を導入し、これらの細胞をCBMFS患者iPS細胞由来ストローマ細胞と共培養することにより白血病細胞の発生をin vitroで再現し、さらにその発生過程を白血病細胞と造血環境の両面から解析することにより、その発生メカニズムの分子基盤を解明し、これを標的とするCBMFSにおける白血病の発症予防法を開発することを目的としている。
これまで我々は、実験系の均てん化のため、まず国立研究開発法人産業技術総合研究所中西博士から供与されたセンダイウイルス(SeV)ベクターを用いて健常人由来iPS細胞を樹立、血球分化効率を検証した。さらに重症先天性好中球減少症患者からの同様の系を用いた疾患特異的iPS細胞の樹立および血球分化実験を行い、疾患特異的な成熟顆粒球への成熟障害の再現を確認した。さらには重症先天性好中球減少症から急性骨髄性白血病を発症した患者の遺伝子変異の解析を行い、白血病発症前後の付加的な遺伝子異常を特定した。
今後は安定化を確立したiPS細胞の樹立系を用いて更なるCBMFS患者からのiPS細胞の樹立、特定した複数の遺伝子変異をのiPS細胞への遺伝子導入、血球分化段階における白血病発症の再現、さらには白血病発症のメカニズムの解析を行う予定である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
iPS細胞の樹立、培養系の確立が培養環境の複数回の汚染などのトラブルにより中断・遅延してしまった。また、樹立済みのiPS細胞についても予期せぬ変異や変質が起こり、正常な血球分化を行うことが困難となったため、あらためてiPS細胞を樹立し再現実験を行うこととなった。 以上より、予定していた実験計画の見直しや予定期間の変更・延長が必要となった。
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| 今後の研究の推進方策 |
iPS細胞の樹立・培養系の見直しを行い、安定した系を再構築した。また、iPS細胞の再樹立と変異などの異常クローンの判別を進めている。
今後はこれまで特定した複数の遺伝子変異のiPS細胞への遺伝子導入、血球分化段階における白血病発症の再現、さらには白血病発症のメカニズムの解析をすすめていく予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
iPS細胞の樹立、培養系の確立が培養環境の複数回の汚染などのトラブルにより中断・遅延してしまった。また、樹立済みiPS細胞についても予期せぬ変異や変質が起こり、正常な血球分化を行うことが困難となったため、あらためてi PS細胞を樹立し再現実験を行うこととなった。 以上より、予定していた実験計画の見直しや予定期間の変更・延長が必要となった。
次年度は再度確立したiPS細胞の樹立・培養系を元にして、当初の計画に沿って適切に予算を使用し、研究を進めていく。
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