| 研究課題/領域番号 |
17K19624
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| 研究機関 | 千葉県がんセンター(研究所) |
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研究代表者 |
筆宝 義隆 千葉県がんセンター(研究所), 発がん制御研究部, 部長 (30359632)
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| 研究分担者 |
丸 喜明 千葉県がんセンター(研究所), 発がん研究グループ 発がん制御研究部, 研究員 (30742754)
田中 尚武 千葉県がんセンター(研究所), 婦人科, 部長 (80236611)
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| 研究期間 (年度) |
2017-06-30 – 2020-03-31
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| キーワード | オルガノイド / マウス / 子宮体がん / 癌肉腫 / 転移 / Kras |
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| 研究実績の概要 |
我々はマウス正常オルガノイドへの複数遺伝子導入により多段階発がん過程の本質的な部分が迅速に再現可能であることを複数の臓器で報告している、そこで、同様の手法を子宮内膜に適用し新規子宮体がんモデルの系統的作成を行った。PTEN変異マウスで子宮体がんの発生が報告されていたが、オルガノイドにおけるPtenノックダウン単独では腫瘍形成が見られなかった。そこで、Kras変異を組み合わせたがやはり腫瘍形成は見られなかった。一方Kras変異にCdkn2aのノックダウンまたはp53のノックアウトを組み合わせたところ、癌肉腫が全例で誘導された。消化器由来オルガノイドではいずれも腺癌が誘導されていたことから、子宮内膜に特異的な現象と考えられた。がん化の過程でKrasの野生型アレルが高頻度で欠失すること、Kras遺伝子の組み替えが生じていないがん細胞が存在することなどを新たに見出したが、これらの形質はいずれも他の臓器の発がんモデルでは観察されていないため、子宮癌肉腫の発症に何らかの関与をしていることが示唆された。
Kras変異とPtenノックダウンの組み合わせは、長期培養オルガノイドを使用した場合のみ腺癌が誘導されることを確認した。興味深いことにリンパ節への転移性を同時に獲得していた。皮下腫瘍および転移巣から再びオルガノイドを樹立して再移植したところ、最終的にはヌードマウスのみならず通常のB6マウスにおいても肺転移性を獲得するにいたった。長期培養中に蓄積した遺伝子変異がこうした発がん・転移能に関与している可能性を考えアレイCGHで遺伝子コピー数を評価したところ、遺伝子Xが段階的に欠失していたことを明らかにした。そこで、Kras変異と遺伝子Xのノックアウトを組み合わせたところ、確かに腺扁平上皮癌が形成され、さらにPtenおよびCdkn2aノックダウンを組み合わせたことで転移も誘導された。
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