| 研究実績の概要 |
CKDはeGFRの低下または尿蛋白を呈し、徐々に腎障害の進展をきたす疾患である。その病態の一部として、腎糸球体ポドサイトが尿中へ脱落あるいはアポトーシスを起こすことが重要な役割を果たしている。今回我々は将来の細胞治療の為に線維芽細胞にポドサイト特異滴な転写因子セットを遺伝子導入することで、ダイレクトリプログラミングによりin vitroにてポドサイトを作成することを目的とした。まず、公共のデータベースならびに過去の文献検索から、ポドサイトに特異的に発現しその分化に関連すると考えられる転写因子としてWt1, Lmxb1, Foxc2, Mafb, Tcf21, Foxd1, Hoxc1, Eya4, Arnt2, Foxd2, Pbx2, Hoxc5, Scx, Sall1, Sox5をピックアップしcDNAクローニングを行なっている。また、マウス胎児Fibroblast (Mef)を採取し３株を樹立した。さらに、Podocin-rtTa, TetOCre, ならびにmTmGマウスを交配しtriple transgenic マウスを作成、Dox誘導を行い腎臓を観察したところ、ポドサイト特異的にGFPの発現を認め、このマウス由来のMefに転写因子の導入を行い、ポドサイト分化のスクリーニングに使用することとした。一方で上記のうちTcf21の培養ポドサイトへの導入を試験的に行なったところ、免疫染色にて核に強い染色を認め、導入が成功していることが示された。
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