ウイルス表面蛋白改変技術を用いた組換えワクチン作製プラットフォーム技術の開発

2018 年度 実施状況報告書

• 研究課題/領域番号: 17K19652
• 研究機関: 三重大学
• 研究代表者: 野阪 哲哉 三重大学, 医学系研究科, 教授 (30218309)
• 研究期間 (年度): 2017-06-30 – 2020-03-31
• キーワード: パラインフルエンザウイルス / 組換えワクチン / エボラウイルスワクチン / hPIV2

研究実績の概要

我々はヒトパラインフルエンザ2型ウイルス（hPIV2）ベクターを基盤とした、ウイルス粒子表面蛋白改変型組換えワクチン開発プラットフォーム技術の確立を目指している。H29年度はモデルワクチンとしてエボラ出血熱の原因ウイルスであるザイール株のエボラウイルスの表面糖蛋白GPを搭載した非増殖型組換えhPIV2ワクチンの作製とその非増殖性・有効性の確認解析、マウスへの投与条件の最適化、その条件下での中和抗体誘導能の解析（VSV/エボラGP pseudotypeウイルスを用いたin vitro感染阻止実験）を行った。H30年度は前年度に引き続き、ワクチン投与マウスの血清中にpseudotypeエボラウイルス感染を明確に阻止する中和抗体活性があることを確証した（北海道大学 人獣共通感染症リサーチセンター 高田礼人 教授との共同研究）。ADE(抗体増強活性)効果も確認した。CTL活性の確認は標的ペプチドが定まらず、成功していないが、エボラウイルスの感染阻止には中和抗体が有効であることがすでに報告されている（Marzi A et al., Proc Natl Acad Sci USA 110: 1893-1898, 2013）ことから、問題ないと考えている。また、組換えウイルス自体の特性解析として抗エボラウイルスGP抗体を用いた免疫電顕解析にてベクター表面に大量のGP蛋白が搭載されていることを確認した（三重大学大学院医学系研究科　溝口明教授との共同研究）。本ワクチンは世界で唯一の完全非増殖型のキメラウイルスワクチンであり、我が国（対岸の火事ではないことを認識する必要がある）のみならず、世界の保健医療におけるエボラウイルス対策の有力候補ワクチンとして大いに期待・貢献できると考えている。

現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

パラインフルエンザ2型ウイルスベクターを用いた遺伝子組換えワクチン創成プラットフォーム技術によるワクチン第一号としてエボラウイルスワクチンを作製 し、中和抗体誘導活性と非増殖性が確認され、さらに、免疫電顕にてhPIV2ベクター粒子の表面にキメラウイルスとして実際にエボラウイルスGP蛋白が搭載されていることが確認されたことから、開発は順調といえる。

今後の研究の推進方策

現実問題として、エボラウイルスワクチンの有効性の評価はわが国では難しく、エボラウイルスワクチンは将来に備えて一旦保存しておき、プラットフォーム技術を用いた他の抗原を搭載した組換えワクチンの作製を推進していくことの方が現実に即した開発ストラテジーであると考える。本命は世界的に開発要望が高い、プレフュージョン型のF蛋白を標的としたRS（Respiratory Syncytial）ウイルスワクチン開発である。

研究成果

• [雑誌論文] Eya2 is critical for E2A-HLF-mediated immortalization of mouse hematopoietic stem/progenitor cells. (2019)
  • 著者名/発表者名: Maharjan BD, Ono R, Nosaka T.
  • 雑誌名: Int J Oncol 巻: 54 ページ: 981-990
  • DOI: 10.3892/ijo.2019.4673.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] Nucleocytoplasmic shuttling of the human parainfluenza virus type 2 phosphoprotein. (2019)
  • 著者名/発表者名: Ohtsuka J, Matsumoto Y, Ohta K, Fukumura M, Tsurudome M, Nosaka T, Nishio M.
  • 雑誌名: Virology 巻: 528 ページ: 54-63
  • DOI: 10.1016/j.virol.2018.12.005.
  • 査読あり / 国際共著
• [雑誌論文] The hemagglutinin-neuraminidase (HN) head domain and the fusion (F) protein stalk domain of the parainfluenza viruses affect the specificity of the HN-F interaction. (2018)
  • 著者名/発表者名: Tsurudome M, Ohtsuka J, Ito M, Nishio M, Nosaka T.
  • 雑誌名: Front Microbiol 巻: 9 ページ: 391
  • DOI: 10.3389/fmicb.2018.00391.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [雑誌論文] Immunological association of inducible bronchus-associated lymphoid tissue organogenesis in Ag85B-rHPIV2 vaccine-induced anti-tuberculosis mucosal immune responses in mice. (2018)
  • 著者名/発表者名: Nagatake T, Suzuki H, Hirata S, Matsumoto N, Wada Y, Morimoto S, Nasu A, Shimojou M, Kawano M, Ogami K, Tsujimura Y, Kuroda E, Iijima N, Hosomi K, Ishii KJ, Nosaka T, Yasutomi Y, Kunisawa J.
  • 雑誌名: Int Immunol 巻: 30 ページ: 471-481
  • DOI: 10.1093/intimm/dxy046.
  • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
• [学会発表] Immunological association of inducible bronchus-associated lymphoid tissue organogenesis in Ag85B-rHPIV2 vaccine-induced anti-tuberculosis mucosal immune responses in mice. (2018)
  • 著者名/発表者名: Nagatake T, Suzuki H, Kawano M, Ogami K, Tsujimura Y, Kuroda E, Iijima N, Hosomo K, Ishii KJ, Yasutomi Y, Kunisawa J, (non-JSI member contributors: Hirata S, Nosaka T).
  • 学会等名: 第47回 日本免疫学会
• [備考] 三重大学大学院医学系研究科 感染症制御医学・分子遺伝学分野
  • URL: http://www.medic.mie-u.ac.jp/microbiol/
• [備考] 三重大学卓越型研究施設 次世代型VLPワクチン研究開発センター
  • URL: http://www.mie-u.ac.jp/research/intro/VLP-vakzin.html
• [産業財産権] 抗がん剤、がん治療用医薬組成物、及びキット (2018)
  • 発明者名: 福村正之、大塚順平、野阪哲哉
  • 権利者名: 三重大学、バイオコモ（株）
  • 産業財産権種類: 特許
  • 産業財産権番号: 特願2018-191262