| 研究課題/領域番号 |
17K19717
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| 研究機関 | 東京医科歯科大学 |
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研究代表者 |
関矢 一郎 東京医科歯科大学, 統合研究機構, 教授 (10345291)
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| 研究分担者 |
岸田 晶夫 東京医科歯科大学, 生体材料工学研究所, 教授 (60224929)
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| 研究期間 (年度) |
2017-06-30 – 2020-03-31
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| キーワード | 移植・再生医療 / 再生医学 |
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| 研究実績の概要 |
変形性膝関節症は主に加齢により関節軟骨が摩耗し、疼痛を生じる病態であり、国内に2,500万人罹患している。半月板損傷に対する切除後欠損に対し、欧米では同種半月板移植が行われるが、抗原性残存、力学的強度低下などの課題が残る。我々はこれらの課題の解決手段として高静水圧印加処理を用いて半月板の脱細胞化が可能であることを検証し、その最適条件（30℃、1000MPaで高圧処理を10分間行った後、DNase含有溶液で3日間の核酸除去処理を37℃で実施）による脱細胞化半月板と、同種移植の従来法である凍結融解処理半月板を組織学的、生化学的、生体力学的観点から比較・検証した。
新鮮ブタ膝内側半月板を用いて、脱細胞化半月板と（半月板を-80℃で冷凍後、37℃で2分間温浴し融解した）凍結融解半月板に関して、未処理群を対照とし、組織学・生化学・生体力学的に解析した。
組織学的には脱細胞群ではHE染色像で核を認めなかった。safranin-o染色像では脱細胞群、凍結融解群ともに未処理群と比較し若干の染色性低下を認めた。脱細胞群のdsDNA重量は4.9 ± 0.8 ng/mgで、未処理群、凍結融解群と比較し有意に約1%まで減少した（P<0.05）。脱細胞群のGAG定量では未処理群と比較すると劣るが、凍結融解群とは同等であった(P=0.093)。圧縮応力は全群で有意差を認めなかった(P=0.38)。
この結果を用いて、次に脱細胞化半月板と凍結融解半月板をブタの背部皮下移植実験を行い、その生体適合性に関して検証するin vivo実験を施行した。現在、その結果について解析中である。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
平成29年度の達成目標である高静水圧印加処理を用いた脱細胞化半月板作成の最適条件の検証を終了し、現在動物への移植実験まで施行し、その結果の考察を行っている最中である。
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| 今後の研究の推進方策 |
脱細胞化ブタ半月板をラットへ移植するxenotransplantation実験を行い、組織の拒絶反応を調べ、その生体適合性を検証する。
また、脱細胞化ブタ半月板を他の細胞と共培養を行い、脱細胞化ブタ半月板への細胞の遊走・生着に関する検証を行う。
最終的に脱細胞化ブタ半月板をイヌなどの中動物へ移植することでその生体適合性および半月板の生着に関して検証する予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
（未使用額が生じた理由）平成29年度に脱細胞化半月板と、凍結融解処理半月板を組織学的、生化学的、生体力学的観点から比較・検証を行い、平成30年度の学会で発表する予定であったが、解析結果が良好であったため、計画を変更して平成29年度に発表を行ったため、追加の解析に必要な物品購入で未使用額が生じた。
（次年度における未使用額の使用計画）このため、追加の解析を平成30年度に行うこととし、未使用額はその経費に充てることとしたい。
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