ユビキチンリガーゼCdc4/Fbw7変異にともなう組織特異的細胞増殖機構の解明

2006 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18013005
• 研究機関: 東北大学
• 研究代表者: 中山 啓子 東北大学, 大学院医学系研究科, 教授 (60294972)
• 研究分担者: 松本 雅記 九州大学, 生体防御医学研究所, 助手 (60380531)
• キーワード: Cdc4 / Nocth / c-Myc / ノックアウトマウス

研究概要

Cdc4/Fbw7はサイクリンE・c-Myc・Notch・c-Junなどのがん遺伝子産物をユビキチン化するユビキチンリガーゼである。Cdc4/Fbw7コンディショナルノックアウトマウスを解析することによって基質タンパク質がノックアウトマウスでは蓄積しているのか、その蓄積によって細胞生物学的な変化がみられるのかを検証した。
Cdc4/Fbw7コンディショナルノックアウトマウスより胎仔線維芽細胞を調製し、Cre recombinaseを発現するアデノウィルスを感染させることによって、培養中にCdc4遺伝子を欠失させた。この欠失によって細胞の増殖が非常に遅くなったが、これは細胞周期のS期への進入が遅延したと同時にアポトーシスが増加したためであった。このとき、Notch1やNotch3、c-Mycの異常な蓄積が見られたが、サイクリンEやc-Junの蓄積は認められなかった。そこでNotchの蓄積があっても転写因子としての機能の発揮を抑制することを目的に、Notchが転写因子として機能する際に共役因子としてプロモーター上で働くRBP-J_KとCdc4/Fbw7のダブルコンディショナルノックアウトマウスを作製し解析した。Cdc4/Fbw7コンディショナルノックアウトマウスで観察された表現型はRBP-JKとのダブルノックアウトマウスとすることで消失することから、Notchの過剰蓄積が細胞増殖停止の原因であると結論づけた。
野生型胎仔線維芽細胞にNotch1を過剰発現した細胞でもCdc4/Fbw7コンディショナルノックアウトマウスと同様の表現型がみられることからも、このことは裏付けられた。

研究成果

• [雑誌論文] PKC-delta plays non-redundant role in insulin secretion in pancreatic beta cell. (2007)
  • 著者名/発表者名: Uchida, T. et al.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 282 ページ: 2707-2716
• [雑誌論文] Asbestos-induced peribronchiolar cell proliferation and cytoKine production are attenuated in lungs of protein kinase C-{delta} knockout mice. (2007)
  • 著者名/発表者名: Shukla, A. et al.
  • 雑誌名: Am. J. Pathol. 170 ページ: 140-151
• [雑誌論文] Noncanonical Wnt signaling through G protein-linked PKCdelta activation promotes bone formation. (2007)
  • 著者名/発表者名: Tu, X.et al.
  • 雑誌名: Dev. Cell 12 ページ: 113-127
• [雑誌論文] The cyclin-dependent kinase inhibitors p57 and p27 regulate neuronal migration in the developing mouse neocortex. (2007)
  • 著者名/発表者名: Itoh, Y. et al.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 282 ページ: 390-396
• [雑誌論文] Skp2 controls adipocyte proliferation during the development of obesity. (2007)
  • 著者名/発表者名: Sakai, T. et al.
  • 雑誌名: J. Biol. Chem. 282 ページ: 2038-2046
• [雑誌論文] Suppression of centrosome amplification after DNA damage depends on p27 accumulation. (2006)
  • 著者名/発表者名: Sugihara, E. et al.
  • 雑誌名: Cancer Res. 66 ページ: 4020-4029
• [雑誌論文] PKCdelta is necessary for Smad3 expression and transforming growth factor beta-induced fibronectin synthesis in vascular smooth muscle cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Ryer, E.J.et al.
  • 雑誌名: Arterioscler. Thromb. Vasc. Biol. 26 ページ: 780-786
• [雑誌論文] HSP27 favors ubiquitination and proteasomal degradation of p27Kip1 and helps S-phase re-entry in stressed cells. (2006)
  • 著者名/発表者名: Parcellier, A. et al.
  • 雑誌名: FASEB J. 20 ページ: 1179-1181
• [雑誌論文] Impaired germ cell development due to compromised cell cycle progression in Skp2-deficient mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: Fotovati, A. et al.
  • 雑誌名: Cell Div. 1 ページ: 4
• [雑誌論文] Transcriptional up-regulation of MMP12 and MMP13 by asbestos occurs via a PKCdelta-dependent pathway in murine lung. (2006)
  • 著者名/発表者名: Shukla, A. et al.
  • 雑誌名: FASEB J. 20 ページ: 997-999
• [雑誌論文] Geminin is essential for the development of preimplantation mouse embryos. (2006)
  • 著者名/発表者名: Hara, K. et al.
  • 雑誌名: Genes Cells 11 ページ: 1281-1293
• [雑誌論文] Mitogenic signalling and the p16lNK4a-Rb pathway cooperate to enforce irreversible cellular senescence. (2006)
  • 著者名/発表者名: Takahashi, A. et al.
  • 雑誌名: Nature Cell Biol. 8 ページ: 1291-1297
• [雑誌論文] Up-regulation of GPR48 induced by down-regulation of p27Kip1 enhances carcinoma cell invasiveness and metastasis. (2006)
  • 著者名/発表者名: Gao, Y.et al.
  • 雑誌名: Cancer Res. 66 ページ: 11623-11631
• [雑誌論文] PKCdelta regulates collagen-induced platelet aggregation through inhibition of VASP-mediated filopodia formation. (2006)
  • 著者名/発表者名: Pula, G. et al.
  • 雑誌名: Blood 108 ページ: 4035-4044
• [雑誌論文] Double knockout mice show BASH and RKCd have different epistatic relationships in B cell maturation and CD40-mediated activation. (2006)
  • 著者名/発表者名: Nojima, T. et al.
  • 雑誌名: lmmunol. Lett. 105 ページ: 48-54