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2007 年度 実績報告書

細菌2成分性膜孔形成毒素の「超チャネル」の構造と形成機構

研究課題

研究課題/領域番号 18054003
研究機関尚絅学院大学

研究代表者

神尾 好是  尚絅学院大学, 総合人間科学部, 教授 (00109175)

キーワード黄色ブドウ球菌 / 細胞崩壊毒素 / ロイコシジン / γヘモリジン / 一分子技術 / ラフト / 2成分毒素
研究概要

1. ヒト多型核白血球膜の不溶性膜画分(DRM)、ラフト上における黄色ブドウ球菌のロイコシジン膜孔オリゴマーの形成:黄色ブドウ球菌のロイコシジン(Luk)はLukSとLukFの2成分が共同してヒト多型核白血球(HPMNL)、単球、マクロファージなどを崩壊する。HPMNLにLukSを単独で作用させると、24%がラフト上に存在し、2成分を作用させた場合には膜に結合した毒素成分の90%がリング状複合体としてラフトに存在した。一方LukFは単独ではラフトには存在しなかった。10mMメチルβサイクロデキストリン処理によりLukのラフトへの集合が阻害され、崩壊活性は示さなかった。これらの結果からLukの2成分がヒト多型核白血球膜上の不溶性膜画分(DRM)ラフト上で膜孔オリゴマーを形成することを明らかにした。
2. 標的細胞膜ラフト上において膜孔の形成並びに膜孔クラスター化を実証した。すなわちCa^<++>包埋ラフトリポソームとメルカプトエタノール存在下でのみステムを形成するプレステムヘテロ7量変異中間体及びローダミン(Rod2)と反応させ、蛍光顕微鏡下でプレステムの本中間体Capドメインからの切り離しタイミングの可視化に成功した。さらに本リポソーム上における膜孔のクラスター化を「一分子測定技術」で可視化に成功した。
3. 膜結合型プロテインキナーゼの発見、及びリン酸化シグナル伝達系の解析: 界面活性剤NP-40で可溶化した白血球膜からラフトリポソームを調製し、本リポソームにLukS、LukF、ATPを添加した結果、LukS上におけるリン酸化反応が起きることを明らかにした。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2008 2007

すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件)

  • [雑誌論文] wo Segments in a Bacterial Antizyme P22 Are Essential for Binding and Enhance Degradation of Lysine/Ornithine Decarboxylase in Selenomonas ruminantium.2008

    • 著者名/発表者名
      Yamaguchi, Y., Y. Takatsuka, and Y. Kamio.
    • 雑誌名

      J. Bacteriol. 190

      ページ: 249-255

    • 査読あり
  • [雑誌論文] 微生物の基礎知識:PVL+MRSA-PVL毒素とは何か-2007

    • 著者名/発表者名
      金子淳、山崎修、岩月啓氏、神尾好是
    • 雑誌名

      感染と消毒、 14

      ページ: 16-19

    • 査読あり

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公開日: 2010-02-04   更新日: 2016-04-21  

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