RNAi依存的ヘテロクロマチン形成に重要なnon-coding RNA転写反応

2006 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18055019
• 研究機関: 京都大学
• 研究代表者: 村上 洋太 京都大学, ウイルス研究所, 助教授 (20260622)
• キーワード: non-coding RNA / ヘテロクロマチン / RNAポリメラーゼII / 転写

研究概要

分裂酵母のRNAi依存的ヘテロクロマチン形成では、ヘテロクロマチン領域から転写されるnon-coding RNAから生成するsiRNAが重要であることが知られている。我々は以前、このヘテロクロマチンでのnon-coding RNAの転写をRNAポリメラーゼIIがおこなうこと、さらにRNAポリメラーゼIIがsiRNAの生成過程に関与することを示していた。本年度は、RNAポリメラーゼIIがsiRNA生成のどのステップで機能しているかを分子遺伝学的手法を用いて解析をおこなった。その結果、RNAポリメラーゼIIはnon-coding RNAが転写された後の運命決定に関わることが明らかとなった。この運命決定の過程では、RNAi経路で重要なArgonauteファミリー蛋白質Ago1およびsiRNAを含むRITS複合体がnon-coding RNAに結合することが必須であることが示されている。我々の詳細な解析結果は、そのRITS複合体のnon-coding RNAへの結合のステップでRNAポリメラーゼIIが機能していることを明確に示している。また予備的な結果からRNAポリメラーゼIIがRITSのサブユニットの一つでRNAi経路で重要なArgonauteファミリー蛋白質Ago1と相互作用することが示唆されている。現在、ヘテロクロマチンからnon-coding RNAの転写をおこなうときにRNAポリメラーゼIIがRITS複合体と相互作用しnon-coding RNAへの結合を促しているというモデルを立てて、その検証をおこなっている。

研究成果

• [雑誌論文] Faster and easier chromatin immunoprecipitation assay with high sensitivity. (2007)
  • 著者名/発表者名: Kohzaki et al.
  • 雑誌名: Proteomics 4 ページ: 10-14
• [雑誌論文] Transscription factor, Runxl recruits the polyomavirus replication origin to replication factories. (2007)
  • 著者名/発表者名: Murakami et al.
  • 雑誌名: J.Cell.Biochem 100 ページ: 1313-1323
• [雑誌論文] The novel gene mus7+ is involved in the repair of replication-associated DNA damage in fission yeast (2007)
  • 著者名/発表者名: Yokoyama et al.
  • 雑誌名: DNA repair (in press)
• [雑誌論文] Runx3 expression during mouse tongue and palate development. (2006)
  • 著者名/発表者名: Yamamoto et al.
  • 雑誌名: Discov Mol Cell Evol Biol. 1 ページ: 695-699
• [雑誌論文] The Cenp-B homolog, Abpl, interacts with the initiation protein Cdc23 and is required for efficient DNA replication in fission yeast. (2006)
  • 著者名/発表者名: Locovei, A. et al.
  • 雑誌名: Cell Division 1 ページ: 27