全反射型蛍光相関分光測定による生体膜結合性分子複合体の研究

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 18207010
• 研究種目: 基盤研究(A)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物物理学
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 金城 政孝 北海道大学, 大学院・先端生命科学研究院, 教授 (70177971)
• 連携研究者: 神 隆 大阪大学, 免疫学フロンティア研究センター, 特任教授 (80206367) ; 藤井 文彦 大阪大学, 免疫学フロンティア研究センター, 特任助教 (40374657)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2008
• キーワード: バイオイメージング / 分子集合体

研究概要

我々は新規に構築した多点全反射型蛍光相関分光装置を用いて細胞膜表面におけるタンパク質分子の拡散速度の多点測定を行った。装置は7本の光ファイバーを利用して全反射面におけるエバネッセント面からの7点の蛍光シグナルを受け,蛍光相関測定が可能である。蛍光強度の揺らぎは光電子増倍管で検出を行い,新規にこの研究で構築した相関器で解析した。実際の細胞測定においては膜結合性の蛍光タンパク質(GFP-F)を発現させ,その拡散速度を7点同時に測定を行った。7点各々の拡散速度はほぼ同じであったが,分子数が各点で異なり,細胞膜表面におけるコンパートメントの存在が示唆された。

研究成果

• [雑誌論文] Multipoint fluorescence correlation spectroscopy with total internal reflection fluorescence microscope (2009)
  • 著者名/発表者名: Ohsugi Y, Kinjo M.
  • 雑誌名: J Biomed Opt. 14 (1) ページ: 014030
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fluorescence cross-correlation spectroscopy of plant proteins (2009)
  • 著者名/発表者名: Muto H, Kinjo M, Yamamoto KT.
  • 雑誌名: Methods Mot Biol. 479 ページ: 203-15
  • 査読あり
• [雑誌論文] The A-and B-type nuclear lamin networks : microdomains involved in chromatin organization and transcription (2008)
  • 著者名/発表者名: Shimi T, Pfleghaar K, Kojima S, Pack CG, Solovei I, Goldman AE, Adam SA, Shumaker DK, Kinjo M, Cremer T, Goldman RD.
  • 雑誌名: Genes Dev. 22 (24) ページ: 3409-21
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cross-talk-free fluorescence cross-correlation spectroscopy by the switching method (2008)
  • 著者名/発表者名: Takahashi Y, Nishimura J, Suzuki A, Ishibashi K, Kinjo M, Miyawaki A.
  • 雑誌名: Cell Struct Funct 33 (1) ページ: 143-50
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reciprocal interaction with G-actin and tropomyosin is essential for aquaporin-2 trafficking (2008)
  • 著者名/発表者名: Noda Y, Horikawa S, Kanda E, Yamashita M, Meng H, Eto K, Li Y, Kuwahara M, Hirai K, Pack C, Kinjo M, Okabe S, Sasaki S
  • 雑誌名: J Cell Biol. 182 (3) ページ: 587-601
  • 査読あり
• [雑誌論文] In vivo quantitative analysis of PKA subunit interaction and cAMP level by dual color fluorescence cross correlation spectroscopy (2008)
  • 著者名/発表者名: Park H, Pack C, Kinjo M, Kaang BK.
  • 雑誌名: Mol Cells 26 (1) ページ: 87-92
• [雑誌論文] Stress-induced environmental changes in a single cell as revealed by fluorescence lifetime imaging (2008)
  • 著者名/発表者名: Nakabayashi T, Nagao I, Kinjo M, Aoki Y, Tanaka M, Ohta N.
  • 雑誌名: Photochem Photobiol Sci. 7 (6) ページ: 671-4
• [雑誌論文] Detection of antigen protein by using fluorescence cross-correlation spectroscopy and quantum-dot-labeled antibodies (2007)
  • 著者名/発表者名: Fujii F, Kinjo M.
  • 雑誌名: Chembiochem 8 (18) ページ: 2199-203
  • 査読あり
• [雑誌論文] Direct quantification of gene expression using fluorescence correlation spectroscopy (2007)
  • 著者名/発表者名: Nomura Y, Nakamura T, Feng Z, Kinjo M.
  • 雑誌名: Curr Pharm Biotechnol. 8 (5) ページ: 286-90
  • 査読あり
• [雑誌論文] Preparation and characterization of thiacalix [4] arene coated water-soluble CdSe/ZnS quantum dots as a fluorescent probe for Cu2+ ions (2007)
  • 著者名/発表者名: Jin T, Fujii F, Yamada E, Nodasaka Y, Kinjo M.
  • 雑誌名: Comb Chem High Throughput Screen 10 (6) ページ: 473-9
  • 査読あり
• [学会発表] 多点全反射蛍光相関装置による細胞測定 (2008)
  • 著者名/発表者名: 金城政孝
  • 学会等名: 第5回バイオオプティクス研究会
  • 発表場所: 浜松
  • 年月日: 2008-12-19
• [学会発表] Study of Membrane-Binding Protein Dynamics with Fluorescence Correlation Spectroscopy (2008)
  • 著者名/発表者名: Kinjo M
  • 学会等名: The Annual Meeting of the Spectroscopical Society of Japan
  • 発表場所: Sendai JAPAN
  • 年月日: 2008-11-20
• [学会発表] Dynamic Aspects of Protein in Living Cell Investigated by Total Internal Reflection Fluorescence Correlation Spectroscopy (2008)
  • 著者名/発表者名: Kinjo M
  • 学会等名: International Congress on Cell Biology
  • 発表場所: Seoul KOREA
  • 年月日: 2008-10-09
• [学会発表] FCSとFCCS (2008)
  • 著者名/発表者名: 金城政孝
  • 学会等名: 第4回ライブセルイメージング講習会
  • 発表場所: つくば
  • 年月日: 2008-10-07
• [学会発表] 蛍光相関分光法を用いた生命システムの解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 金城政孝
  • 学会等名: 日本物理学会2008年秋季大会
  • 発表場所: 盛岡
  • 年月日: 2008-09-22
• [図書] 生細胞蛍光イメージング (2007)
  • 著者名/発表者名: 金城政孝
  • 出版者: 共立出版
• [図書] 「4章蛍光相関分光法」(蛍光分光とイメージングの手法, 御橋廣真編) (2006)
  • 著者名/発表者名: 金城政孝, 西村吾朗
  • 総ページ数: 133-160
  • 出版者: 学会出版センター
• [備考]
  • URL: http://www.lfsci.hokudai.ac.jp/labs/infmed/index.html