転写因子NF-kB制御による安全な肝臓移植法の開発

2007 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18209041
• 研究機関: 北海道大学
• 研究代表者: 藤堂 省 北海道大学, 大学院・医学研究科, 教授 (60136463)
• 研究分担者: 梅澤 一夫 慶應義塾大学, 理工学部, 教授 (70114402) ; 岸野 吏志 明治薬科大学, 薬学部, 教授 (90373026) ; 古川 博之 北海道大学, 大学院・医学研究科, 特任教授 (70292026) ; 尾崎 倫孝 北海道大学, 大学院・医学研究科, 特任教授 (80256510)
• キーワード: NF-KB / DHMEQ / 免疫抑制 / 臓器保存 / 虚血・再かん流障害

研究概要

1) 新規NF-kB阻害剤DHMEQのin vitroにおける免疫抑制効果の検討
H18年度の検討に引き続いて、マウス免疫担当細胞の応性に対する新規NF-kB阻害剤DHMEQのin vitroでの効果の確認とその機序を検討した。マウスT細胞をもちいた実験で、DHMEQは抗体・抗原刺激による細胞増殖を用量依存性に抑制し、それに伴う増殖性サイトカイン(IL-2,IFN一γ)産生も抑制した。樹状細胞でLPS/TNF一α刺激に伴う細胞成熟および活性化(CD40,CD80,CD86,MHC class IIの発現)を用量依存性に抑制した。Kupffer細胞では、LPS刺激によるTNF-α及びIL-6産生を抑制することが示された。
2) 新規NF-kB阻害剤DHMEQのin vivoにおける免疫抑制効果の検討
1) 移植モデル(マウス心移植による急性拒絶および慢性拒絶モデル)および糖尿病マウスへの膵島移植モデルにおけるDHMEQ の免疫抑制作用を確認し(グラフト生着率の改善)、それらに関わる炎症性サイトカイン産生の抑制を確認した。
2) DHMEQ による血管内皮細胞および血管平滑筋細胞の増殖抑制効果を確認し、小動物モデルにて動脈硬化抑制にたいする効果を確認した。
3) DHMEQにより樹状細胞の分化が抑制されることを確認し、小動物モデルにより分化抑制され樹状細胞が移植後の拒絶反応を制能することを確認した。
3) 新規NF-kB阻害剤DHMEQのin vitroにおける肝保存効果の検討
H18年度のin vitroの検討では、肝細胞とクッパー細胞の共培養実験を行ない、低酸素・再酸素化状態により引き起こされる肝細胞障害は非常に程度が強いものの、DHMEQにて効果的に抑制されることを確認した。その作用機序は、クッパー細胞のNF-kB活性を抑えることにより、TNF-alphaなどのサイトカイン分泌を抑えることにより発現することによると考えられた。この結果をもとに、ラット単離肝還流装置をもちいて、臓器レベルでの虚血・再かん流実験をおこない、DHMEQの効果を確認している。H19年度は、ラット単離肝潅流装置のセットアップ(潅流装置の組み立ておよび種々のマーカーのモニタリング方法の確立)を完了させ、ラットからの肝摘出手技の確立と実際のex vivoでの潅流実験を行なった。

研究成果

• [雑誌論文] The effect of antagonism of adenosine A1 receptor against ischemia and reperfusion injury of the liver (2007)
  • 著者名/発表者名: Magata S, Taniguchi M, Suzuki T, Shimamura T, Fukai M, Furukawa H, Fujita M, Todo S
  • 雑誌名: Journal of Surgical Research 139 ページ: 7-14
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Novel Fully Human Anti-CD40 Monoclonal Antibody, 4D11, for Kidney Transplantation in Cynomolgus Monkeys (2007)
  • 著者名/発表者名: Imai A, Suzuki T, Sugitani A, Itoh T, Ueki S, Aoyagi T, Yamashita K, Taniguchi M, Takahashi N, Miura T, Shimamura T, FurukawaH, Todo S
  • 雑誌名: Transplantation 84(8) ページ: 1020-1028
  • 査読あり
• [雑誌論文] The novel NF-kB inhibitor, Dehydroxymethylepoxyquinomicin(DHMEQ)prevents local and remote organ injury following intestinal ischemia/reperfusion in rats.
  • 著者名/発表者名: Tomomi Suzuki, Kenichiro Yamashita, Wataru Jomen, Shinya Ueki, Takeshi Aoyagi, Moto Fukai, Hiroyuki Furukawa, Kazuo Umezawa, Michitaka Ozaki, Satoru Todo
  • 雑誌名: J Surg Res (In press)
  • 査読あり
• [学会発表] "THE IMMUNOMODULATORY EFFECT OF DONOR SPECIFIC TRANSFUSION PLUS NF-kB BLOCKADE BY UTILIZING A NOVEL INHIBITOR, DHMEQ. (2008)
  • 著者名/発表者名: Ryoichi Goto, Kenichiro Yamashita, Takeshi Aoyagi, Shinya Ueki, Rumi Igarashi, Motohiro Uno, Tetsu Oura, Masaaki Watanabe, Tomohiro Shibata, Masahiko Taniguchi, Tomomi Suzuki, Tsuyoshi Shimamura, Hiroyuki furukawa, Michitaka Ozaki, Kazuo Umezawa, Satoru Todo
  • 学会等名: 8th international conference
  • 発表場所: Berlin, Germany Intercontinental Berlin hotel
  • 年月日: 20080214-17
• [学会発表] 選択的NFkB阻害剤DHMEQのドナー投与によるマウス膵島肝内移植成績の改善効果 (2008)
  • 著者名/発表者名: 高橋 徹、松本秀一朗、敦賀陽介、葛西弘規、細田充主、渡辺正明、古川博之、松下通明、藤堂 省、尾崎倫孝、梅澤一夫
  • 学会等名: 第20回代用臓器・再生医学研究会
  • 発表場所: 札幌 北海道大学学術交流会館
  • 年月日: 2008-02-02
• [学会発表] Nuclear factor kappa B阻害とDonor specific transfusion併用による免疫抑制効果 (2007)
  • 著者名/発表者名: 後藤了一
  • 学会等名: 第43回日本移植学会総会
  • 発表場所: 仙台国際センター
  • 年月日: 20071122-24
• [学会発表] Donor pretreatment with a novel NF-kB inhibitor, DHMEQ can a lleviate the graft damage in syngenic marginal islet transplantation. (2007)
  • 著者名/発表者名: Tohru Takahashi, Suichiro Matsumoto, Yosuke Tsuruga, Hironori Kasai, Masaaki Watanabe, Michitaka Ozaki, Hiroyuki Furukawa, Michiaki Matsushita, Kazuo Umezawa and Satoru Todo
  • 学会等名: Cell Transplantation society 2007 Joint Conference
  • 発表場所: Minneapolisハイアットリージェンシー
  • 年月日: 20070915-20
• [学会発表] "EFFECT OF A NOVEL NF-kB INHIBITOR, DEHYDROXYMETHYLEPOXYQUINOMICIN IN COMBINATION WITH DONOR SPECIFIC TRANSFUSION IN MOUSE HEART TRANSPLANTATION. (2007)
  • 著者名/発表者名: Ryoichi Goto, Kenichiro Yamashita, Takeshi Aoyagi, Motohiro Uno, Shinya Ueki, Tomoo Itoh, Masahiko Taniguchi, Tomomi Suzuki, Tsuyoshi Shimamura, Hiroyuki Furukawa, Michitaka Ozaki, Kazuo Umezawa, Satoru Todo
  • 学会等名: American Transplant Congress
  • 発表場所: San Francisco, CA Moscone West Convention Cneter
  • 年月日: 20070505-09
• [学会発表] 新規NF-kB阻害剤"DHMEQ"の漫性拒絶反応抑制効果 (2007)
  • 著者名/発表者名: 植木伸也、山下健一郎、青柳武史、鈴木友己、谷口雅彦、嶋村剛、梅澤一夫、古川博之、尾崎倫孝、藤堂 省
  • 学会等名: 第107回日本外科学会定期学術集会
  • 発表場所: 大阪国際会議場
  • 年月日: 20070411-13
• [学会発表] The SDF-1 and CXCR4 Interaction is Critical for the Development of Transplantation Arteriosclerosis(SDF-1とCXCR4の結合が漫性拒絶の進行に重要である) (2007)
  • 著者名/発表者名: 崎浜秀康、増永太郎、山下健一郎、橋本 卓、猪部 学、藤堂 省、上出利光
  • 学会等名: 第11回北海道移植フォーラム
  • 発表場所: 札幌 北海道大学学術交流会館
  • 年月日: 2007-05-26