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2007 年度 実績報告書

KIAA遺伝子群の遺伝子欠損法による機能解析と巨大蛋白質複合体の同定

研究課題

研究課題/領域番号 18310137
研究機関(財)かずさDNA研究所

研究代表者

中山 学  かずさDNA研究所, ヒトゲノム研究部・ゲノム解析技術研究室, 主任研究員 (30370927)

キーワード遺伝子 / ゲノム / 動物 / 脳・神経 / 発生・分化 / 機能ゲノム / 巨大蛋白質 / 蛋白質複合体
研究概要

KIAA蛋白質を含めた巨大な蛋白質は蛋白質複合体の中心的働きをすると考えられるため、KIAA蛋白質を欠損させれば、機能蛋白質複合体の機能全体に影響を与え、遺伝子欠損マウスで明らかな表現型を示すという仮説を提唱している。既に作製したKIAA遺伝子欠損マウスの中で明らかな表現型を示すKIAA遺伝子に焦点を絞り、実際に細胞内でこれらの巨大蛋白質を含む機能蛋白質複合体の同定し、巨大蛋白質を含む生体内のネットワークが存在することを示した。KIAA1447遺伝子欠損マウスは、大部分の仔マウスは生後すぐに死亡し、骨格の染色により骨格の成長不良が観察される一方、ごく稀にアダルトのステージまで成長できるKIAA1447-/-マウスが生じ、運動機能障害を示すことが明らかになっている。KIAA1447蛋白質は核に顆粒状に局在するが、この穎粒状の局在は核小体等の既知の核内構造体とは一致しないことから、KIAA1447蛋白質を中心とした新規な蛋白質複合体の存在が示唆された。このKIAA1447蛋白質を含む巨大蛋白質を含む複合体を生化学的な手法で明確にするために、KIAA1447蛋白質のC末端部分に精製用のTAPタグまたはEGFPを付加した後、テトラサイクリンの添加により発現誘導される安定発現細胞を作製した。安定発現株より調整した核抽出液をセファクリルS-300を用いたゲルろ過法を用いて、分子量の解析を行った。その結果、2000kDa以上の巨大な複合体として存在することが明らかになった。巨大複合体の構成蛋白質を同定することは今後の課題であるが、以上の結果からKIAA蛋白質を中心とした蛋白質複合体の存在を明確にすることができた。このような複合体の存在は、上記の仮説とよく一致している。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2007

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] The mammalian Ced-1 ortholog MEGF10/KIAA1780 displays a novel adhesion pattern.2007

    • 著者名/発表者名
      Suzuki E.
    • 雑誌名

      Exp. Cell Res. 313

      ページ: 2451-2464

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 査読あり
  • [雑誌論文] MEGF10 is a mammalian ortholog of CED-1 that interacts with clathr in assembly protein complex 2 medium chain and induces large vacuole formation.2007

    • 著者名/発表者名
      Suzuki E.
    • 雑誌名

      Exp. Cell Res. 313

      ページ: 3729-3742

    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • 査読あり
  • [雑誌論文] Targeted disruption of the murine large nuclear KIAA1440/Intsl protein causes growth arrest in early blastocyst stage embryos and eventual a poptotic cell death2007

    • 著者名/発表者名
      Hata T.
    • 雑誌名

      Biochimica et Biophysica Acta(BBA)-Molecular Cell Research 1773

      ページ: 1039-1051

    • 査読あり
  • [学会発表] マウス初期胚の発生・生存に関与する巨大核蛋白質KIAA1440/Ints1の機能解析2007

    • 著者名/発表者名
      秦 利幸
    • 学会等名
      日本分子生物学会
    • 発表場所
      横浜
    • 年月日
      2007-12-11
    • 説明
      「研究成果報告書概要(和文)」より

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公開日: 2010-02-04   更新日: 2016-04-21  

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