生体内情報伝達分子の可視化検出法に関する研究

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 18350045
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 分析化学
• 研究機関: 東京大学 (2007-2008); 分子科学研究所 (2006)
• 研究代表者: 小澤 岳昌 東京大学, 大学院・理学系研究科, 教授 (40302806)
• 研究分担者: 竹内 雅宜 東京大学, 大学院・理学系研究科, 助教 (00332271)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2008
• キーワード: 可視化 / バイオテクノロジー / 分析化学 / 生体分子

研究概要

本研究では,蛍光タンパク質GFPとその誘導体,および発光タンパク質の一つであるルシフェラーゼを情報変換分子として,我々がこれまで開発した「タンパク質再構成法」を展開・応用し情報伝達分子の可視化法に関する研究を行った.ルシフェラーゼをプロテインスプライシングにより環状化した新たなプローブ設計の原理や,タンパク質間相互作用を時空間解析する分割ルシフェラーゼの開発など,新規なプローブ開発の概念を創出した.本成果は,生理機能の解明に大きく貢献することが期待できる.

研究成果

• [雑誌論文] High-Sensitivity Real-Time Imaging of Dual Protein-Protein Interactions in Living Subjects Using Multicolor Luciferases (2009)
  • 著者名/発表者名: N. Hida, M. Awais, M. Takeuchi, N. Ueno, M. Tashiro, T. Singh, M. Hayashi, K. Ohmiya, T. Ozawa
  • 雑誌名: PLoS ONE 4 ページ: e5868
  • 査読あり
• [雑誌論文] Cyclic Luciferase for Real-Time Sensing of Caspase-3 Activities in Living Mammals (2007)
  • 著者名/発表者名: A. Kanno, Y. Yamanaka, H. Hirano, Y. Umezawa, T. Ozawa
  • 雑誌名: Angew.Chem.Int.Ed. 46 ページ: 7595-7599
  • 査読あり
• [雑誌論文] Nongenomic Activity of Ligands in the Association of Androgen Receptor with Src. S.B. Kim (2007)
  • 著者名/発表者名: A. Kanno, T. Ozawa, H. Tao, Y. Umezawa
  • 雑誌名: ACS Chem.Biol. 2 ページ: 484-492
  • 査読あり
• [雑誌論文] Imaging Dynamics of Endogenous Mitochondrial RNA in Single Living Cells (2007)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa, Y. Natori, M. Sato, Y. Umezawa
  • 雑誌名: Nature Methods 4 ページ: 413-419
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Minimal Peptide Sequence That Targets Fluorescent and Functional Proteins into the Mitochondrial Intermembrane Space (2007)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa, Y. Natori, Y. Sako, H. Kuroiwa, T. Kuroiwa, Y. Umezawa
  • 雑誌名: ACS.Chem.Biol. 2 ページ: 176-186
  • 査読あり
• [雑誌論文] A Proinflammatory Cytokine Sensor Cell for Assaying Inflammatory Activities of Nanoparticles (2007)
  • 著者名/発表者名: S. B. Kim, T. Ozawa, H. Tao, Y. Umezawa
  • 雑誌名: Anal.Biochem. 362 ページ: 148-150
  • 査読あり
• [雑誌論文] Methods for Imaging and Analyses of Intracellular Organelles Using Fluorescent and Luminescent Proteins (2007)
  • 著者名/発表者名: M. Takeuchi, T. Ozawa
  • 雑誌名: Anal.Sci. 23 ページ: 25-29
  • 査読あり
• [雑誌論文] Genetically Encoded Optical Probe for Detecting Release of Proteins from Mitochondria toward Cytosol in Living Cells and Animals (2006)
  • 著者名/発表者名: A. Kanno, T. Ozawa, Y. Umezawa
  • 雑誌名: Anal.Chem. 78 ページ: 8076-8081
  • 査読あり
• [雑誌論文] A. Method for Determining the Activities of Cytokines based on the Nuclear Transport of Nuclear Factor-Kappa B (2006)
  • 著者名/発表者名: S. B. Kim, Y. Natori, T. Ozawa, H. Tao, Y. Umezawa
  • 雑誌名: Anal.Biochem. 359 ページ: 147-149
  • 査読あり
• [雑誌論文] Intein-Mediated Reporter Gene Assay for Detecting Protein-Protein Interactions in Living Mammalian Cells (2006)
  • 著者名/発表者名: A. Kanno, T. Ozawa, Y. Umezawa
  • 雑誌名: Anal.Chem. 78 ページ: 556-560
  • 査読あり
• [雑誌論文] Designing Split Reporter Proteins for Analytical Tools (2006)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa
  • 雑誌名: Anal.Chim.Acta 556 ページ: 58-68
  • 査読あり
• [学会発表] Optical Imaging of Biomolecules in Living Cells and Animals Using Split-Reporter Reconstitution Analyses (2009)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa
  • 学会等名: 3rd International Workshop on Approaches to Single Cell Analysis
  • 発表場所: Zurich
  • 年月日: 20090900
• [学会発表] Fluorescence and bioluminescence biomolecular imaging : From single cells to living subjects (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa
  • 学会等名: 11th International Symposium of Spectroscopical Society of Japan
  • 発表場所: Sendai
  • 年月日: 20081100
• [学会発表] Optical Imaging of Biomolecules in Living Cells and Animals Using Split-Reporter Reconstitution Analysis (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa
  • 学会等名: 1st Workshop in the Advanced Light Microscopy (DKFZ)
  • 発表場所: Heidelberg
  • 年月日: 20081000
• [学会発表] Visualization of Biomolecules Using Split Reporter Reconstitution ; From a Single Cell to Living Animals (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa
  • 学会等名: International Symposium of Institute for Innovative Cancer Research
  • 発表場所: Seoul
  • 年月日: 20081000
• [学会発表] Visualization of Biomolecules in Living Cells Using Split-reporter Reconstitution Analysis (2008)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa
  • 学会等名: NIPS-JST International Workshop [Advanced Nonlinear Imaging & Fluorescence-based Biosensors]
  • 発表場所: Aichi
  • 年月日: 20080400
• [学会発表] Protein Engineering for Biomolecular Imaging (2007)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa
  • 学会等名: Tateshina Conference
  • 発表場所: Nagano
  • 年月日: 20071100
• [学会発表] Visualization of organelle-localized proteins in living cells using split-reporter reconstitution analysis (2007)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa
  • 学会等名: VII European Symposium of the Protein Society, Stockholm
  • 発表場所: Sweden
  • 年月日: 20070500
• [学会発表] Imaging Biomolecules in Living Cells and Animals Using Split-Reporter Reconstitution Analysis (2007)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa
  • 学会等名: 1st International Symposium on Nanomedicine
  • 発表場所: Aichi
  • 年月日: 20070400
• [学会発表] Genetic approaches to identifying mitochondrial proteins and their localization (2007)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa
  • 学会等名: Asian Society for Mitochondrial Research and Medicine, Seoul
  • 発表場所: Korea
  • 年月日: 20070200
• [学会発表] Design of split reporter proteins for biomolecular imaging (2006)
  • 著者名/発表者名: T. Ozawa
  • 学会等名: Korean Society of Medical Biochemistry and Molecular Biology
  • 発表場所: Seoul, Korea
  • 年月日: 20061000
• [図書] クラゲから生まれたGFP革命 (2008)
  • 著者名/発表者名: 小澤岳昌, 宮脇敦史
  • 総ページ数: 25-28
  • 出版者: 現代化学
• [図書] 可視化プローブによる時空間情報を損なわないミトコンドリアRNAの動態観察 (2008)
  • 著者名/発表者名: 小澤岳昌
  • 総ページ数: 199-206
  • 出版者: ナノイメージング
• [図書] 生理機能を可視化する新たな分子プローブ, ナノメディシン, 宇理須恒雄編 (2008)
  • 著者名/発表者名: 小澤岳昌
  • 総ページ数: 13-24
  • 出版者: オーム社
• [図書] 「細胞の構造と機能 : 細胞内」ナノテクのためのバイオ入門, 荻野俊郎, 宇理須恒雄編 (2007)
  • 著者名/発表者名: 小澤岳昌
  • 総ページ数: 第1章
  • 出版者: 共立出版
• [図書] バイオ・ケミルミネセンスハンドブック, 今井一洋, 近江谷克裕編 (2006)
  • 著者名/発表者名: 小澤岳昌
  • 総ページ数: 第1章1.4.2
  • 出版者: 丸善株式会社
• [備考] 日経産業新聞2009年11月19日12面細胞常時観察タンパク質「発光の強さ2倍に」
  • URL: http://www.chem.s.u-tokyo.ac.jp/users/analyt/index.html
• [産業財産権] 活性化プロテアーゼインジケーター (2010)
  • 発明者名: 梅澤喜夫, 小澤岳昌, 管野憲
  • 権利者名: 東京大学
  • 産業財産権番号: 4491516号
  • 取得年月日: 2010-04-16
• [産業財産権] cyclicGMP検出方法 (2008)
  • 発明者名: 小澤岳昌, 竹内雅宜, 三浦研二
  • 権利者名: 東京大学
  • 産業財産権番号: 特願2008-164927
  • 出願年月日: 2008-06-24
• [産業財産権] タンパク質問相互作用の検出法 (2008)
  • 発明者名: 小澤岳昌, ムハンマド アワイス, 三浦研二
  • 権利者名: 東京大学
  • 産業財産権番号: 特願20080107
  • 出願年月日: 2008-01-07
• [産業財産権] 活性化プロテアーゼインジケーター (2007)
  • 発明者名: 梅澤喜夫, 小澤岳昌, 管野憲
  • 権利者名: 東京大学
  • 産業財産権番号: 特願2007-124924
  • 出願年月日: 2007-05-09