研究課題
基盤研究(B)
TN-GnRHニューロンへの感覚入力:感覚受容器で受容された環境の変化がTN-GnRHニューロンに入力する機構を解明するため、GluRやGABARを介するシナプス入力がペースメーカー活動に対して及ぼす影響を電気生理学的に解析した。その結果、通常の成体脳ではあまり見られないGABAARを介する興奮性シナプス伝達がこの感覚入力に関与していることを示唆する結果が得られた。培養脳スライスや単離培養ニューロンを用いた解析:TN-GnRHニューロンの複雑な神経突起を薄い空間に再構成させ、Ca^<2+>イメージング、神経活動記録、 GnRH放出の電気化学測定・膜容量測定による開口放出の定量化などを行うために、TN-GnRHニューロンの単離培養系の開発を行った。先端径が太く滑らかな表面を持つガラスピペットを用いてTN-GnRHニューロンのクラスターからGnRHニューロンを吸引し、カバーグラス上にて単離培養した結果、健全に成長する神経突起を持つた単独あるいは数個のGnRHニューロンを数日間単離培養することができるようになった。トランスジェニックメダカを用いた解析=3種の異なる機能を持つGnRHペプチドを合成するGnRHニューロンをGFP標識したトランスジェニックメダカを作成し、これを用いて中脳の単一GnRHニューロンから脊椎動物で初めてその電気活動を記録した。その結果、同じく神経修飾作用を持つと考えられる終神経GnRHニューロンと同様にきわめて規則的なペースメーカー活動をしていることが初めて明らかとなり、このような活動が脳内における神経修飾作用と密接な関係を持つことが示唆された。視床下部GnRHニューロンの電気活動記録:脳下垂体に投射してホルモンとして働く視索前野GnRHニューロンから電気活動を記録したところ、活動期と正式が不規則に交番するという、神経修飾作用をもつGnRHニューロンとは全く異なる活動を示すことがわかり、この活動がGnRHペプチドホルモンの放出と密接な関係を持つことが示唆された。
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