還元的TCAサイクルにより炭酸固定を行う独立栄養生物であるHydrogenobacter thermophilusの、「還元的TCAサイクルの関連代謝系の統合的研究」で、本年度は以下の事柄を明らかにした。 1.本菌のアミノ酸代謝系について、アミノ基転移酵素を3種類精製し、その生化学的特性を明らかにした。グリオキシル酸を基質とする反応が複数検出されたことから、本菌の代謝系中での同物質の重要性が示唆された。ただし、今のところ、グリオキシル酸生成反応は明らかにされていないため、今後重点的に明らかにする必要がある。 2.本菌の同化的窒素代謝に関して、硝酸還元酵素を精製し、還元型フェレドキシンが電子供与体なっていることを明らかにした。 3.本菌の同化型窒素代謝に関して、亜硝酸還元酵素の大腸菌を用いた異種発現に成功した。還元型フェレドキシンが電子供与体となっていることが示唆された。2及び3の実験結果から、本菌おけるフェレドキシンの代謝的重要性がさらに明確になった。4とも絡む事柄であるが、フェレドキシン還元系を早急に明らかにしたい。 4.フェレドキシンアフィニティカラムを用いて、フェレドキシンと相互作用するタンパク質を網羅的に検索し、硫黄酸化酵素群がそのようなタンパク質として得られた。硫黄酸化酵素群が発現している必然性、フェレドキシンとの関連性など、今後生化学的に明らかにすべき重要課題と認識している。
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