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2006 年度 実績報告書

2つの新規なプロテアーゼファミリーの発見とそれらの生化学的研究

研究課題

研究課題/領域番号 18380068
研究機関京都工芸繊維大学

研究代表者

小田 耕平  京都工芸繊維大学, 工芸科学研究科, 教授 (50081584)

研究分担者 平賀 和三  京都工芸繊維大学, 工芸科学研究科, 助手 (50252549)
キーワードプロテアーゼ / ペプチダーゼ / sedolisin / eqolisin / セリン-カルボキシルプロテアーゼ / グルタミン酸プロテアーゼ
研究概要

Sedolisinsについて:1)CLN2のサブサイト構造解析:致死性神経性疾患、バッテン病に関係するCLN2のサブサイト構造を現在、解析中。次年度に終了予定。この成果は、バッテン病の病態解析につながる。2)立体構造の解析:CLN2の構造・機能解明の一環として、本年度は多量調製法の開発を行った。現在、精製した標品を使用し結晶化を試みている。結晶が得られると、研究協力者と共同して立体構造解析を行う。本酵素は、結晶化困難な酵素である。3)反応至適pHを大幅に変換した酵素の創出:SedolisinsのGlu残基をHis残基に置換することにより、反応至適pHをアルカリ側に有する酵素の構築を検討する予定であったが、人手不足のため未検討である。
Eqohsinについて:1)反応メカニズムの解明:改変体の作成、及び阻害剤の開発を通じて、反応メカニズムの解明を行う。2)サブサイト構造(基質特異性)の解析:基質特異性を精査し、いまだ不明のサブサイト構造を解明する。また、反応速度論的解析に、高感度基質を開発する。3)特異的インヒビターのデザインと合成:基質特異性を基盤にインヒビターを開発する。4)合成インヒビターと酵素の複合体の構造解析:EI複合体を作成し、その構造解析を行う。1)から4)までの計画は、予定通り進行し、その成果をJ.Mol.Biol.(2007)に発表した。5)自然界での分布:現在のところ、カビのみに発見されている。データベース検索や、実際の検索を行ってその分布状況を明らかにする。未検討であり次年度に行う。
以上、本年度予定した研究課題は、概ね順調に進んだと考える。

  • 研究成果

    (3件)

すべて 2006

すべて 雑誌論文 (3件)

  • [雑誌論文] Processing, catalytic activity and crystal structures of kumamolisin-As with an engineered active site2006

    • 著者名/発表者名
      Ayumi Okubo, 他8名
    • 雑誌名

      FEBS Journal 273

      ページ: 2563-2576

  • [雑誌論文] Synergetic effects of pressure and chemical denaturant an protein unfolding : stability of a serine-type carboxyl protease, kumamolisin2006

    • 著者名/発表者名
      Yasunori Fujimoto, 他5名
    • 雑誌名

      Biochim.Biophys.Acta 1764

      ページ: 364-371

  • [雑誌論文] Crystal structure of scytalidoglutamic peptidase with its first potent inhibitor provides insights into substrate specificity and catalysis2006

    • 著者名/発表者名
      B.Pillai 他5名
    • 雑誌名

      J.Mol.Biol. 365

      ページ: 343-361

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公開日: 2008-05-08   更新日: 2016-04-21  

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