血液型抗原発現クローン豚の作出-免疫寛容誘導法の確立-

2007 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18380162
• 研究機関: 帯広畜産大学
• 研究代表者: 小川 晴子 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 准教授 (10400079)
• 研究分担者: 大西 彰 独立行政法人農業生物資源研究所, 発生分化研究グループ, 発生工学研究チーム長 (30414890) ; 小林 孝彰 名古屋大学, 医学部・寄附講座, 教授 (70314010)
• キーワード: 移植 / 拒絶反応 / 免疫寛容 / 血液型抗原 / クローン動物 / 核移植 / リンパ球 / ABO

研究概要

臓器不足を背景にABO不適合腎移植が行われているが、移植臓器に発現するABO不適合抗原に対する抗体が産生される結果、拒絶反応が発生し得る。本研究はABO不適合移植に応用する事ができる免疫寛容誘導法を確立し、同移植の安全性をより高める事を目的としている。本研究課題では、マウスを用いてABO式血液型抗原(ABO抗原)に対する免疫寛容の誘導法を検討するとともに、より人に近い大動物実験モデルとしてABO抗原を発現するクローンブタを作出し、それを用いて免疫寛容の誘導について検討する事を目指す。
平成19年度に実施した研究内容を以下に要約する。
1.遺伝子導入によりヒトのA抗原またはB抗原を定常発現するブタ胎児由来線維芽細胞を樹立し、これらの細胞をドナー細胞として用いた核移植を行うことによりA型のクローンブタを作出する事ができた。目的とする血管内皮細胞へ強くABO抗原を発現するクローンブタを得る為に、ヒト型のO抗原を更に強く発現させるための手法について検討している。
2.ヌクレオフェクション法によりB抗原を発現させたリンパ球を静脈内投与することによりマウスにおいてB抗原に対する免疫寛容を誘導する事ができた。同様の方法によりブタおよびヒヒのリンパ球にもABO抗原を発現させ得る事を確認できた。ブタにおいてA抗原またはB抗原に対して免疫寛容を誘導するための実験を行っている。
4.より効率的な遺伝子導入を実現させる目的でブタおよびヒヒのリンパ球の培養方法について検討している。
5.マウスにおいて免疫寛容または免疫順応が誘導された時のABO抗原特異的なB細胞の機能について検討している。

研究成果

• [雑誌論文] Alternative strategy for overcoming ABO incompatibility (2007)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Liu D, Ogawa H, Miwa Y, Nagasaka T, Maruyama S, Li Y-T, Onishi A, Kuzuya T, Kadomatsu K, Uchida K, Nakao A
  • 雑誌名: Transplantation 83 ページ: 1284-1286
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prophylactic treatment of antibody-mediated rejection with high-dose mizoribine and pharmacokinetic study (2007)
  • 著者名/発表者名: Liu D, Kobayashi T, Nagasaka T, Miwa Y, Ma Y, Yokoyama I, Kuzuya T, Oikawa T, Morozumi K, Uchida K, Nakao A
  • 雑誌名: Transplant International 30 ページ: 365-370
  • 査読あり
• [学会発表] Induction of B cell tolerance to incompatible ABO Blood group antigens in transplantation (2007)
  • 著者名/発表者名: Ogawa H, Galili U
  • 学会等名: IPTA-IXA 2007 Joint conference
  • 発表場所: Minneapolis(USA)
  • 年月日: 20070915-20
• [学会発表] Successful removal of blood group A/B antigen in organs by ex vivo and in vivo administration of endo-beta-galactosidase(ABasse) (2007)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Ogawa H, Liu D, Nagasaka T, Miwa Y, Katayama A, Maruyama S, Li Y-T, Onishi A, Uchida K
  • 学会等名: IPTA-IXA 2007 Joint conference
  • 発表場所: Minneapolis(USA)
  • 年月日: 20070915-20
• [学会発表] Pig kidney expressing both endo-beta-galactosidase C and hDAF prevented hyperacute rejection in baboon without antibody removal (2007)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Onishi A, Liu D, Nagasaka T, Miwa Y, Katayama A, Maruyama S, Iwamoto M, Uchida K, Nakao A
  • 学会等名: IPTA-IXA 2007 Joint conference
  • 発表場所: Minneapolis(USA)
  • 年月日: 20070915-20
• [学会発表] Significance of human DAF and thrombomodulin gene transfer for coagulation control in pig to human xenotransplantation (2007)
  • 著者名/発表者名: Miwa Y, Yamamoto K, Katayama A, Nagasaka T, Onishi A, Iwamoto M, Kadomatsu K, Uchida K, Nakao A, Kobayashi T
  • 学会等名: IPTA-IXA 2007 Joint conference
  • 発表場所: Minneapolis(USA)
  • 年月日: 20070915-20
• [学会発表] Reduction of Blood Group A/B Antigen Expression in Organ by In Vivo Infusion of endo-β-Galactosidase. (2007)
  • 著者名/発表者名: Kobayashi T, Liu DG, Ogawa H, Miwa Y, Nagasaka T, Maruyama S, Li Y-T, Onishi A, Kuzuya T, Kadomatsu K, Uchida K, Nakao A
  • 学会等名: American Transplant Congress 2007
  • 発表場所: San Francisco(USA)
  • 年月日: 20070522-27
• [学会発表] Related versus unrelated living donor ABO-lncompatible kidney transplantation: Are spousal living donors a good source of kidneys for ABO-incompatible living transplantation? (2007)
  • 著者名/発表者名: Uchida K, Katayama A, Nagasaka T, Goto N, Morozumi K, Takeda A, Goto Y, Kobayashi T, Nakao A
  • 学会等名: American Transplant Congress 2007
  • 発表場所: San Francisco(USA)
  • 年月日: 20070522-27
• [学会発表] Beneficial effect of human DAF and thrombomodulin expression in pig endothelial cells on coagulation control (2007)
  • 著者名/発表者名: Miwa Y, Kobayashi T, Yamamoto K, Nagasaka T, Liu DG, Kuzuya T, Onishi A, Kadomatsu K, Uchida K, Nakao A
  • 学会等名: American Transplant Congress 2007
  • 発表場所: San Francisco(USA)
  • 年月日: 20070522-27
• [図書] ABO血液型不適合移植の新戦略-2007- (2007)
  • 著者名/発表者名: 小林孝考、齋藤和英
  • 総ページ数: 86
  • 出版者: 日本医学館