哺乳類卵子の品質の判定法の開発:卵胞選抜の分子制御機構に基づいて

2006 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 18380164
• 研究機関: 東京大学
• 研究代表者: 眞鍋 昇 東京大学, 農学生命科学研究科, 教授 (80243070)
• 研究分担者: 宮野 隆 神戸大学, 農学部, 教授 (80200195) ; 奥田 潔 岡山大学, 自然科学研究科, 教授 (40177168)
• キーワード: 哺乳類 / 卵巣 / 卵胞 / 選択的死滅 / アポトーシス / 細胞死受容体 / カスパーゼ / アポトーシス阻害因子

研究概要

多様な生殖戦略をもつ脊椎動物のうちで、多くの魚類のように数千から数億の仔の中で幸運かつ優れたものだけが生き残る生殖戦略と異なり、哺乳類は性周期毎に1〜10個の僅かな数の卵母細胞を排卵して授精し、胎児を母体内で発生させてから出産し、それを大切に育てる生殖戦略をとって繁栄してきた。成熟した哺乳類の卵巣には、胎児期に途中で減数分裂を休止している卵母細胞(卵子)が5〜100万個含まれ、性周期毎に卵子は卵胞とともに発育・成熟して排卵に至る。この課程で、最終的に排卵にいたる卵胞・卵子の100倍以上が発達を開始するが、99%以上が選択的に死滅してしまい、1%未満のみが排卵に至る。このような卵胞・卵子の選択的死滅は、より優秀で強靭な子孫を残すための選抜戦略として重要であるが、これを制御している分子機構の全容は未だに解明されていない。本研究は、哺乳類の卵巣において繰り返される卵胞・卵子の選択的死滅を制御している分子機構を解明し、これをもとに本来死滅すべき低品質卵子と排卵にいたる高品質卵子を分別し、体細胞クローン動物作出などの様々な動物バイオテクノロジーに供される卵子の品質を保証できる技術を確立することを目指している。今年度は、卵胞に発現している細胞死受容体とデコイ受容体を同定し、細胞死受容体を介するアポトーシスシグナルの細胞内伝達系を担うカスパーゼ系の解析を進めた。さらに細胞膜直下に局在してアポトーシスシグナル伝達を阻害している新規な阻害因子(cFLIP:代表者らが遺伝子とアミノ酸配列を決定した)が顆粒層細胞に高発現している卵胞の卵子の健常性が高いらしいことを突き止めたので、これをパラメーターとして卵子品質判定法の開発を進めている。

研究成果

• [雑誌論文] Experimental evidence for the influence of cumulus-oocyte-complexes on sperm release from the porcine oviductal sperm reservoir. (2006)
  • 著者名/発表者名: Klaus-Peter Brussow, Helmut Torner, Jozsef Ratky, Noboru Manabe, Armin Tuchscherer
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Devevelopment 52・2 ページ: 249-257
• [雑誌論文] Genetic characteristics of inbred Wuzhishan miniature pig, a native Chinese breed. (2006)
  • 著者名/発表者名: Xilong Wang, Jiangtao Ou, Liguang Huang, Masugi Nishihara, Junyou Li, Noboru Manabe, Yuan Zhang
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Devevelopment 52・5 ページ: 639-643
• [雑誌論文] The regulation of ovarian granulosa cell death by pro- and anti-apoptotic molecules. (2006)
  • 著者名/発表者名: Fuko Matsuda-Minehata, Naoko Inoue, Yasufuini Goto, Noboru Manabe.
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Devevelopment 52・6 ページ: 695-705
• [雑誌論文] Changes in expression levels and localization of Fas ligand and Fas during atresia in porcine ovarian follicles. (2006)
  • 著者名/発表者名: Naoko Inoue, Akihisa Maeda, Fuko Matsuda-Minehata, Katsuhiro Fukuta, Noboru Manabe
  • 雑誌名: Journal of Reproduction and Devevelopment 52・6 ページ: 723-730
• [雑誌論文] The initiator caspase, caspase-10beta, and the BH-3-only molecule, Bid, demonstrate evolutionary conservation in Xenopus of their pro-apoptotic activities in the extrinsic and intrinsic pathways. (2006)
  • 著者名/発表者名: Katsuya Kominami, Chiyo Takagi, Tomoko Kurata, Atsushi Kitayama, Masami Nozaki, Tatsuya Sawasaki, Keisuke Kuida, Yaeta Endo, Noboru Manabe, Naoto Ueno, Kazuhiro Sakamaki
  • 雑誌名: Genes to Cells 11・5 ページ: 701-717
• [雑誌論文] A novel strategy for preventing human CD8(+) cytotoxic T lymphocyte-mediated Cctotoxicity against pig endothelial cells by overexpression of pig cellular FLICE-like inhibitory protein (c-FLIP) gene. (2006)
  • 著者名/発表者名: Masahiro Tanemura, Ayami Saga, Koichi Kawamoto, Fuko Matsuda-Minehata, Noboru Manabe, Toshirou Deguchi, Toshirou Nishida, Yoshiki Sawa, Toshinori Ito
  • 雑誌名: Transplantation Progress 38・12 ページ: 3315-3317
• [雑誌論文] Erythropoietin-producing cells in the liver of ICR-derived glomerulonephritis (ICGN) mice. (2006)
  • 著者名/発表者名: Misuzu Yamaguchi-Yamada, Naotsugu Akashi, Yasufumi Goto, Sayuri Anan, Yoshie Yamamoto, Atsuo Ogura, Noboru Manabe
  • 雑誌名: The Journal of Veterinary Medical Science 68・1 ページ: 65-68
• [雑誌論文] Temporal and topographic profiles of tissue hypoxia following transient focal cerebral ischemia in rats. (2006)
  • 著者名/発表者名: Takahisa Noto, Yasuhisa Furuichi, Masayuki Ishiye, Nobuya Matsuoka, Ichiro Aramori, Seitaro Mutoh, Takehiko. Yanagihara, Noboru Manabe
  • 雑誌名: The Journal of Veterinary Medical Science 68・7 ページ: 803-807
• [雑誌論文] Changes in expression of anti-apoptotic protein, cFLIP, in granulose cells during follicular atresia in porcine ovaries. (2006)
  • 著者名/発表者名: Noboru Manabe, Fuko Matsuda-Minehata, Yasufumi Goto, Akihisa Maeda, Yuan Cheng, Takafumi Sai, Miyuki Kohori, Maiko Endo, Junyou Li
  • 雑誌名: European Journal of Cellular and Molecular Physiopathology 44・1 ページ: 120-124
• [雑誌論文] Anti-apoptotic activity of porcine cFLIP in ovarian grabulosa cell lines. (2006)
  • 著者名/発表者名: Noboru Manabe, Fuko Matsuda-Minehata, Yasufumi Goto, Akihisa Maeda, Yuan Cheng, Takafumi Sai, Miyuki Kohori, Maiko Endo, Junyou Li
  • 雑誌名: European Journal of Cellular and Molecular Physiopathology 44・1 ページ: 125-129
• [雑誌論文] Molecular cloning of porcine; cellular flice-like inhibitory protein. (2006)
  • 著者名/発表者名: Noboru Manabe, Fuko Matsuda-Minehata, Yasufumi Goto, Akihisa Maeda, Yuan Cheng, Takafumi Sai, Miyuki Kohori, Maiko Endo, Junyou Li
  • 雑誌名: European Journal of Biology and Chemistry of Proteins 18・2 ページ: 201-204
• [雑誌論文] Changes in the expression of bid in granulosa cells during follicular atresia in pig ovaries. (2006)
  • 著者名/発表者名: Noboru Manabe, Fuko Matsuda-Minehata, Yasufumi Goto, Akihisa Maeda, Yuan Cheng, Takafumi Sai, Miyuki Kohori, Maiko Endo, Junyou Li
  • 雑誌名: European Journal of Biology and Chemistry of Proteins 18・2 ページ: 205-208
• [雑誌論文] Production of infectious hepatitis C virus particles in three-dimensional cultures of the cell line carrying the genome-length dicistronic viral RNA of genotype 1b. (2005)
  • 著者名/発表者名: Kyoko Murakami, Koji Ishii, Yousuke Ishihara, Sayaka Yoshizaki, Keiko Tanaka, Yasufumi Gotoh, Hideki Aizaki, Michinori Kohara, Hiroshi Yoshioka, Yuichi Mori, Noboru Manabe, Ikuo Shoji, Tetsutaro Sata, Ralf Bartenschlager, Yoshiharu Matsuura, Tatsuo Miyamura, Tetsuro Suzuki.
  • 雑誌名: Virology 351・3 ページ: 381-392
• [図書] Gamete Biology : Emerging frontiers on fertility and contraceptive development. (2007)
  • 著者名/発表者名: Takashi Miyano, Noboru Manabe
  • 総ページ数: 545
  • 出版者: Nottingham University Press
• [図書] 図説動物形態学 (2006)
  • 著者名/発表者名: 眞鍋 昇
  • 総ページ数: 176
  • 出版者: 朝倉書店
• [図書] ウシの解剖 (2006)
  • 著者名/発表者名: 眞鍋 昇
  • 総ページ数: 138
  • 出版者: 学窓社
• [図書] 犬の解剖・カラーリングアトラス (2006)
  • 著者名/発表者名: 眞鍋 昇
  • 総ページ数: 122
  • 出版者: 学窓社
• [図書] 基礎から学ぶ犬の繁殖ハンドブック (2006)
  • 著者名/発表者名: 眞鍋 昇
  • 総ページ数: 184
  • 出版者: インターズー