| 研究課題/領域番号 |
18380169
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| 研究機関 | 近畿大学 |
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研究代表者 |
佐伯 和弘 近畿大学, 生物理工学部, 教授 (10298937)
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| 研究分担者 |
細井 美彦 近畿大学, 生物理工学部, 教授 (70192739)
松本 和也 近畿大学, 生物理工学部, 教授 (20298938)
三谷 匡 近畿大学, 先端技術総合研究所, 准教授 (10322265)
田口 善智 近畿大学, 生物理工学部, 講師 (70309269)
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| キーワード | 共役脂肪酸 / ウシ / 筋衛星細胞 / リノール酸異性化酵素遺伝子 / 脂肪細胞 / 共役リノール酸 / 腸内嫌気性細菌 |
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| 研究概要 |
共役リノール酸は発ガン抑制や抗肥満などの効果が報告されている。これまでに、共役リノール酸を合成できるリノール酸異性化酵素遺伝子(PISOM)が、ウシの腸内嫌気性細菌(Propionibacterium acnes)から単離された(Rosson et al.,2001)。本研究では共役リノール酸を畜肉や乳汁中に蓄積させ、それを摂取することで人の健康によい家畜を作出できるのではないかと考えた。そこで本研究では哺乳動物細胞での酵素活性を検討するために、哺乳動物細胞発現ベクターを構築し、ウシ筋衛星細胞に導入した。玉川大学今村教授より分与されたPropionibacterium acnesから単離されたリノール酸異性化酵素(Linoleate isomerase)遺伝子(PISOM)を哺乳動物細胞発現するように作製したベクター(pCAG/PAISOM/IRES/EGFP/SV40(neo^r))を、遺伝子導入試薬を用いてウシ筋衛生細胞へ導入した。G418により選択した後さらにEGFP蛍光により遺伝子導入細胞を選択した。4継代以上培養し、安定的に遺伝子が導入されている細胞株を3株得た。RT-PCRにより遺伝子発現を解析した結果、PAISOMの発現が確認できた。さらに、脂肪細胞へ分化誘導した結果、脂肪細胞への分化能を有していた。現在、得られた細胞株での共役リノール酸含量について検討している。
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