研究課題
基盤研究(B)
本研究では、2つのSLP-76ファミリーアダプター分子(MISTとSLP-76)の面から、マスト細胞と好塩基球の細胞分化、機能発現ならびにFcεRIを介したシグナル伝達について検討した。1)FcεRI・c-Kit陽性のマスト細胞ならびにはFcεRI陽性c-Kit陰性の好塩基球はインターロイキン3(IL-3)存在下でMIST、SLP-76単独および二重欠損マウス骨髄からも野性型マウス骨髄と同様に分化することから、マスト細胞ならびに好塩基球の分化にはSLP-76ならびにMISTは必須でないことが明らかになった。2)MIST欠損では軽度に、SLP-76欠損では顕著に脱顆粒反応の低下が認められ、二重欠損ではそれが完全に消失した。このことから、FcεRIを介したマスト細胞の脱顆粒反応においては、SLP-76が中心的な役割を担っており、MISTは補助的な役割を担っているものと考えられた。3)FcεRI刺激によるサイトカインの発現誘導は、MIST、SLP-76それぞれの単独欠損においては野生型と同程度認められたが、MIST/SLP-76二重欠損にすると顕著に低下することから、MISTとSLP-76はお互いにその機能を補い合っていることが示唆された。4)FcεRI刺激に伴う細胞内カルシウム濃度の上昇、それに関与するPLC_γ1およびPLC_γ2のリン酸化はSLP・76欠損マスト細胞で顕著に低下しており、MIST/SLP-76二重欠損細胞でさらに低下した。一方、カルシウム反応に関与しないFcεRIシグナル伝達系と考えられているAKTのリン酸化を解析したところ、MIST、SLP-76単独欠損、および二重欠損いずれのマスト細胞においても、野性型と同程度あるいはやや亢進した反応が認められた。5)FcεRI刺激に伴う分子間相互作用、細胞内局在の変化と機能との関連について解析を行った結果、1)SLP-76はGadsと結合できるが、MISTは結合しないこと、2)SLP・76のGads結合ドメインをMISTに移植することにより、MISTの膜へのリクルートがSLP-76と同程度に増強すること、3)Grb2結合ドメインを欠くMIST変異体も野生型MISTと同程度に膜にリクルートされるが、非機能的SH2ドメインをもつMIST変異体のFcεRI刺激に伴う膜局在は認められないこと、4)MISTはFcεRI誘導性の脱課粒反応をわずかにしか増強させないが、SLP-76と同程度の膜移行が認められるGads結合ドメインを有するMIST変異体は、SLP-76を導入した場合と同レベルの増強効果を示すこと、が明らかになった。以上の研究成果は、MISTとSLP-76は、カルシウム反応に依存したFcεRIシグナル伝達経路を正に制御しており、シグナル分子複合体の量的差異だけでなく、シグナルを下流に伝達する質的差異によって、FcεRIを介したマスト細胞の脱穎粒反応が制御されていることを明らかにしたものであり、I型アレルギー発症におけるFcεRIを発現するマスト細胞や好塩基球の活性化の制御機構を解明する上で重要な基礎的知見である。
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International Immunology 20
ページ: 345-352
Immunogenetics 60
ページ: 105-114
Int. Immunol (in press)
Immunogenetics (in press)
The Journal of Immuology 178
ページ: 262-270
Proc.Natl.Acad.Sci.USA 104
ページ: 15063-15068
J. Immunol 178(1)
Proc. Natl. Acad. Sci. USA 104(38)
Blood 107
ページ: 3647-3655
International Immunology 18
ページ: 775-783
Immunology letters 105
ページ: 48-54
Blood 108
ページ: 2703-2711
Blood 107(9)
Immunol. Lett 105(1)
Int. Immunol 18(5)
Blood 108(8)
