重要動物原虫症を一滴の血液で網羅的に診断可能なペプチドアレイの開発

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 18380181
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 応用獣医学
• 研究機関: 国立大学法人帯広畜産大学
• 研究代表者: 五十嵐 郁男 国立大学法人帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (80159582)
• 研究分担者: 中村 一哉 国立感染症研究所, ウイルス研究室, 研究員 (00400078)
• 連携研究者: 玄 学南 帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (10292096)
• 研究協力者: 井関 博 動物衛生研究所, ウイルス病研究チーム, 研究員 ; 玉城 志保 帯広畜産大学, 畜産学科4年
• 研究期間 (年度): 2006 – 2009
• キーワード: 重要原虫病 / 網羅的 / 診断 / ペプチド(プロテイン)アレイ / 血清 / 少量試料

研究概要

バベシア病等の原虫感染症は、世界規模で家畜に甚大な被害を与えている。現在、多くの動物が海外から日本に輸入されており、これらの動物の原虫病の日本への侵入を水際で阻止することが重要である。そこで、本研究において、一滴の血液サンプルから多数の原虫感染症を網羅的に診断できる血清診断法の開発を目的とした。その結果、組換え抗原を用いて2種類のバベシア原虫を同時に検出可能なプロテインアレイの開発に成功した。今後、他の原虫を加えることにより、多数の原虫症を一度に診断可能な新規血清診断法となる事が期待される。

研究成果

• [雑誌論文] Divergence of the mitochondrial genome structure in the apicomplexan parasites, Babesia and Theileria (2010)
  • 著者名/発表者名: Hikosaka K, Watanabe YI, Tsuji N, Kita K, Kishine H, Arisue N, Palacpac NM, Kawazu SI, Sawai H, Horii T, Igarashi I, Tanabe K.
  • 雑誌名: Mol Biol Evol. 27(5) ページ: 1107-1116
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibitory effect of terpene nerolidol on the growth of Babesia parasites (2010)
  • 著者名/発表者名: Aboulaila M, Sivakumar T, Yokoyama N, Igarashi I.
  • 雑誌名: Parasitol Int. 59 ページ: 278-282
  • 査読あり
• [雑誌論文] Seroprevalence of Babesia infections of dairy cows in northern Thailand (2010)
  • 著者名/発表者名: Iseki H, Zhou L, Kim C, Inpankaew T, Sununta C, Yokoyama N, Xuan X, Jittapalapong S, Igarashi I.
  • 雑誌名: Vet. Parasitol. 170 ページ: 193-196
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development and evaluation of a nested PCR based on spherical body protein 2 gene for the diagnosis of Babesia bovis infection (2010)
  • 著者名/発表者名: Aboulaila M, Yokoyama N, Igarashi I.
  • 雑誌名: Vet Parasitol. 169(1-2) ページ: 45-50
  • 査読あり
• [雑誌論文] Inhibitory effects of(-)-Epigallocatechin-3-gallate from green tea on the growth of Babesia parasites (2010)
  • 著者名/発表者名: Aboulaila M, Yokoyama N, Igarashi I.
  • 雑誌名: Parasitology 37(5) ページ: 785-791
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of Babesia bigemina 200 kDa recombinant antigen in enzyme-linked immunosorbent assay (2009)
  • 著者名/発表者名: Altangerel K, Alhassan A, Iseki H, Sivakumar T, Boldbaatar D, Yokoyama N, Igarashi I.
  • 雑誌名: Parasitol Res. 105(1) ページ: 249-254
  • 査読あり
• [雑誌論文] Epidemiological survey of Theileria orientalis infection in grazing cattle in the eastern part of Hokkaido, Japan (2009)
  • 著者名/発表者名: Ota N, Mizuno D, Kuboki N, Igarashi I, Nakamura Y, Yamashina H, Hanzaike T, Fujii K, Onoe S, Hata H, Kondo S, Matsui S, Koga M, Matsumoto K, Inokuma H, Yokoyama N.
  • 雑誌名: J Vet Med Sci. 71(7) ページ: 937-944
  • 査読あり
• [雑誌論文] Isolation and pathogenic characterization of an OB1 variant of Babesia rodhaini which has a glycophorin A-independent pathway to murine red blood cells (2009)
  • 著者名/発表者名: Takabatake N, Iseki H, Ikehara Y, Kanuka H, Yokoyama N, Sekimizu K, Igarashi I.
  • 雑誌名: Vet Parasitol. 159(2) ページ: 97-104
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prevalence and genotyping of Cryptosporidium species from farm animals in Mongolia (2008)
  • 著者名/発表者名: Burenbaatar B, Bakheit MA, Plutzer J, Suzuki N, Igarashi I, Ongerth J, Karanis P.
  • 雑誌名: Parasitol Res. 102(5) ページ: 901-905
  • 査読あり
• [雑誌論文] Babesia : The protective effects of killed Propionibacterium acnes on the infections of two rodent Babesia parasites in mice (2008)
  • 著者名/発表者名: Iseki H, Takabatake N, Ota N, Ishigame T, Yokoyama N, Igarashi I.
  • 雑誌名: Exp Parasitol. 118(4) ページ: 543-548
  • 査読あり
• [雑誌論文] Diagnostic real-time PCR assay for the quantitative detection of Theileria equi from equine blood samples (2008)
  • 著者名/発表者名: Kim CM, Blanco LB, Alhassan A, Iseki H, Yokoyama N, Xuan X, Igarashi I.
  • 雑誌名: Vet Parasitol. 151(2-4) ページ: 158-163
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of a rapid immunochromatographic test for simultaneous serodiagnosis of bovine babesioses caused by Babesia bovis and Babesia bigemina (2008)
  • 著者名/発表者名: Kim CM, Blanco LB, Alhassan A, Iseki H, Yokoyama N, Xuan X, Igarashi I.
  • 雑誌名: Am J Trop Med Hyg. 78 ページ: 117-121
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method for diagnosis of equine piroplasmosis (2007)
  • 著者名/発表者名: Alhassan A, Thekisoe OM, Yokoyama N, Inoue N, Motloang MY, Mbati PA, Yin H, Katayama Y, Anzai T, Sugimoto C, Igarashi I.
  • 雑誌名: Vet Parasitol. 143 ページ: 155-160
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of a multiplex loop-mediated isothermal amplification (mLAMP) method for the simultaneous detection of bovine Babesia parasites (2007)
  • 著者名/発表者名: Iseki H, Alhassan A, Ohta N, Thekisoe OM, Yokoyama N, Inoue N, Nambota A, Yasuda J, Igarashi I.
  • 雑誌名: J Microbiol Methods 71 ページ: 281-287
  • 査読あり
• [雑誌論文] Asexual growth of Babesia bovis is inhibited by specific sulfated glycoconjugates (2007)
  • 著者名/発表者名: Bork S, Yokoyama N, Hashiba S, Nakamura K, Takabatake N, Okamura M, Ikehara Y, Igarashi I.
  • 雑誌名: J Parasitol. 93(6) ページ: 1501-154
  • 査読あり
• [雑誌論文] Glycophorin A-knockout mice, which lost sialoglycoproteins from the red blood cell membrane, are resistant to lethal infection of Babesia rodhaini (2007)
  • 著者名/発表者名: Takabatake N, Okamura M, Yokoyama N, Ikehara Y, Akimitsu N, Arimitsu N, Hamamoto H, Sekimizu K, Suzuki H, Igarashi I.
  • 雑誌名: Vet Parasitol. 148 ページ: 93-101
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel 57-kDa merozoite protein of Babesia gibsoni is a prospective antigen for diagnosis and serosurvey of canine babesiosis by enzyme-linked immunosorbent assay (2007)
  • 著者名/発表者名: Aboge GO, Jia H, Terkawi MA, Goo Y, Kuriki K, Nishikawa Y, Igarashi I, Suzuki H, Xuan X.
  • 雑誌名: Vet Parasitol. 149 ページ: 85-94
  • 査読あり
• [雑誌論文] Babesia bovis : Effects of cysteine protease inhibitors on in vitro growth (2007)
  • 著者名/発表者名: Okubo K, Yokoyama N, Govind Y, Alhassan A, Igarashi I.
  • 雑誌名: Exp Parasitol. 117 ページ: 214-217
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of a host erythrocyte sialic acid content in Babesia bovis infection (2007)
  • 著者名/発表者名: Takabatake N, Okamura M, Yokoyama N, Okubo K, Ikehara Y, Igarashi I.
  • 雑誌名: J Vet Med Sci. 69 ページ: 999-1004
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of Taqman-Based Real-Time PCR Assays for Diagnostic Detection of Babesia bovis and Babesia bigemina (2007)
  • 著者名/発表者名: Kim C, Iseki H, Herbas MS, Yokoyama N, Suzuki H, Xuan X, Fujisaki K, Igarashi I.
  • 雑誌名: Am J Trop Med Hyg. 77 ページ: 837-841
  • 査読あり
• [雑誌論文] Development of two immunochromatographic tests for the serodiagnosis of bovine babesiosis (2007)
  • 著者名/発表者名: Kim C, Alhassan A, Verdida RA, Yokoyama N, Xuan X, Fujisaki K, Kawazu S, Igarashi I.
  • 雑誌名: Vet Parasitol. 148 ページ: 137-143
  • 査読あり
• [雑誌論文] Species-specific loop-mediated isothermal amplification (LAMP) for diagnosis of trypanosomosis (2007)
  • 著者名/発表者名: Thekisoe OM, Kuboki N, Nambota A, Fujisaki K, Sugimoto C, Igarashi I, Yasuda J, Inoue N.
  • 雑誌名: Acta Trop. 102 ページ: 182-189
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparison of polymerase chain reaction methods for the detection of Theileria equi infection using whole blood compared with pre-extracted DNA samples as PCR templates (2007)
  • 著者名/発表者名: Alhassan A, Iseki H, Kim C, Yokoyama N, Igarashi I.
  • 雑誌名: Trop Anim Health Prod. 39 ページ: 369-374
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparative evaluation of the sensitivity of LAMP, PCR and in vitro culture methods for the diagnosis of equine piroplasmosis (2007)
  • 著者名/発表者名: Alhassan A, Govind Y, Tam NT, Thekisoe OM, Yokoyama N, Inoue N, Igarashi I.
  • 雑誌名: Parasitol Res. 100 ページ: 1165-1168
  • 査読あり
• [雑誌論文] An Immunochromatographic Test for the Simultaneous Serodiagnosis of Babesia caballi and B. equi Infections in Horses (2006)
  • 著者名/発表者名: Huang X, Xuan X, Verdida R A, Zhang S, Yokoyama N, Xu L, Igarashi I.
  • 雑誌名: Clin Vaccine Immunol. 13 ページ: 553-555
  • 査読あり
• [雑誌論文] Evaluation of enzyme-linked immunosorbent assays with recombinant antigens for the serodiagnosis of equine Babesia infections (2006)
  • 著者名/発表者名: Huang X, Xuan X, Yokoyama N, Katayama Y, Anzai T, Igarashi I.
  • 雑誌名: Vet.Parasitol. 140 ページ: 158-161
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression of C-terminal truncated and full-length Babesia bigemina rhoptry-associated protein 1 and their potential use in enzyme-linked immunosorbent assay (2006)
  • 著者名/発表者名: Boonchit S, Alhassan A, Chan B, Xuan X, Yokoyama N, Ooshiro M, Goff WL, Waghela SD, Wagner G, Igarashi I.
  • 雑誌名: Vet.Parasitol. 137 ページ: 28-35
  • 査読あり
• [学会発表] Molecular characterization of a new spherical body protein of Babesia bovis and evaluation its potential use for serodiagnosis (2010)
  • 著者名/発表者名: Terkawi M Alaa, Sensu J, AbouLaila M, 横山直明, 玄学南, 五十嵐郁男
  • 学会等名: 第149回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 武蔵野市
  • 年月日: 20100326-20100328
• [学会発表] 北海道十勝・日高管内における生息マダニの小型ピロプラズマの保有調査 (2009)
  • 著者名/発表者名: 横山直明, 他9名
  • 学会等名: 第148回日本獣医学会
  • 発表場所: 鳥取市
  • 年月日: 20090925-20090927
• [学会発表] Development of a loop-mediated isothermal amplification method for rapid diagnosis of Babesia microti infection (2009)
  • 著者名/発表者名: Iseki Hiroshi, 他4名
  • 学会等名: XXII Conference of the World Association for the Advancement of Veterinary Parasitology
  • 発表場所: カルガリー
  • 年月日: 20090808-20090813
• [学会発表] ヒトバベシアの症の簡易迅速診断法の開発 (2009)
  • 著者名/発表者名: 井関博, C. Kim, 齋藤あつ子, 箕田友香, 猪熊壽, 横山直明, 五十嵐郁男
  • 学会等名: 第147回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 栃木県総合文化センター
  • 年月日: 20090402-20090404
• [学会発表] Inhibitory effect of (-) Epigallocatechin 3 gallate from green tea on the growth of Babesia parasites (2009)
  • 著者名/発表者名: Abou-Laila M., 横山直明, 五十嵐郁男
  • 学会等名: 第78回日本寄生虫学会大会
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 20090327-20090328
• [学会発表] タイにおけるウシバベシア症の疫学調査 (2008)
  • 著者名/発表者名: 周麗佳, 井関博, Tawin Inpankaew, 横山直明, 玄学南, Sathaporn Jittapalapong, 五十嵐郁男
  • 学会等名: 第146回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: シーガイア(宮崎県)
  • 年月日: 20080924-20080926
• [学会発表] Application of the immunochromatographic test (ICT) for the diagnosis of tick borne-disease (2008)
  • 著者名/発表者名: 五十嵐郁男, ほか7名
  • 学会等名: VI International Conference on ticks and tick-borne pathogens
  • 発表場所: ブエノスアイレス
  • 年月日: 20080921-20080926
• [学会発表] ピロプラズマ類原虫及びマラリア原虫ミトコンドリアのゲノム構造 (2008)
  • 著者名/発表者名: 彦坂健児, ほか5名
  • 学会等名: 第77回日本寄生虫学会
  • 発表場所: 長崎市
  • 年月日: 20080403-20080404
• [学会発表] Diagnostic real-time PCR assay for the quantitative detection of Theileria equi from equine blood samples (2008)
  • 著者名/発表者名: 横山直明, C. Kim, L. Blanco, A. Alhassan, 玄学南, 五十嵐郁男
  • 学会等名: 第145回日本獣医学会学術集会
  • 発表場所: 麻布大学キャンパス
  • 年月日: 20080328-20080330
• [学会発表] Development of real-time PCR assays for detection of B. bovis and Babesia bigemina (2007)
  • 著者名/発表者名: C. Kim, ほか4名
  • 学会等名: 第143回日本獣医学会
  • 発表場所: つくば
  • 年月日: 20070403-20070405
• [学会発表] ウシバベシア症の簡易迅速診断法を目的としたmLAMP (Multiplex Loop-mediated isothermal amplification) 法の確立 (2007)
  • 著者名/発表者名: 井関博, ほか5名
  • 学会等名: 第76回日本寄生虫学会
  • 発表場所: 吹田市
  • 年月日: 20070329-20070330
• [学会発表] Development of a Multiplex Loop-Mediated Isothermal Amplification (mLAMP) Method for Rapid Detection of Bovine Babesia parasites (2007)
  • 著者名/発表者名: 五十嵐郁男, 他6名
  • 学会等名: The 2nd Thailand-Japan Joint Forum on Infectious Diseases
  • 発表場所: バンコック
  • 年月日: 2007-10-08
• [学会発表] Development of immunochromatographic test for serodiagnosis of bovine babesiosis (2006)
  • 著者名/発表者名: C. Kim, ほか5名
  • 学会等名: 第142回日本獣医学会
  • 発表場所: 山口
  • 年月日: 20060922-20060924
• [学会発表] Development of loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method for diagnosis of equine piroplasmosis (2006)
  • 著者名/発表者名: Alhassan, ほか11名
  • 学会等名: A. 第11回世界寄生虫学会
  • 発表場所: グラスゴー
  • 年月日: 20060806-20080811
• [学会発表] A cysteine protease inhibitor (cystatin) from Heamaphysalis longicornis is involved in tick innate immunity (2006)
  • 著者名/発表者名: J. Zhou, 他4名
  • 学会等名: 第75回日本寄生虫学会
  • 発表場所: 弘前
  • 年月日: 20060519-20060520
• [図書] イラストでみる猫の病気 (2008)
  • 著者名/発表者名: 小野憲一郎, 他編
  • 総ページ数: 128-129
  • 出版者: 講談社
• [図書] 犬・猫の感染症と寄生虫病 (2007)
  • 著者名/発表者名: 長谷川篤彦, 監訳
  • 総ページ数: 293-297, 303-309, 310-312, 313-314, 315-318, 328-332, 333-337
  • 出版者: インターズー
• [備考] ホームページ等
  • URL: http://www.obihiro.ac.jp/~protozoa/index.html