受精に関与する新規ユビキチン化酵素の研究

2008 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 18390022
• 研究種目: 基盤研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 応募区分: 一般
• 研究分野: 生物系薬学
• 研究機関: 名古屋大学
• 研究代表者: 澤田 均 名古屋大学, 大学院・理学研究科, 教授 (60158946)
• 研究分担者: 原田 淑人 名古屋大学, 大学院・理学研究科, 助教 (50362223)
• 研究期間 (年度): 2006 – 2008
• キーワード: 受精 / 精子 / ユビキチン / プロテアソーム / ユビキチン化酵素 / ホヤ

研究概要

受精は, 生物が種を保存する上で不可欠なプロセスである。受精を成立させるためには、精子は糖タンパク質性の卵保護層(卵黄膜)に精子通過口を開ける必要があり、この溶解物質はライシンと呼ばれている。新口動物におけるライシンは精子プロテアーゼであると考えられているが, その詳細は不明である。我々は、ホヤにおいて、精子の新規ユビキチンープロテアソーム系がライシンとして細胞外で機能することを見いだした。今回は、カタユウレイボヤを用いて、そのユビキチン化酵素の探索を行い、精子/精巣で特異的に発現する本酵素を同定することに成功した。

研究成果

• [雑誌論文] Comprehensiveegg coat proteome of the ascidian Ciona intestinalis reveals gamete recognition molecules involved in self-sterility (2009)
  • 著者名/発表者名: Yamada, L., Saito, T., Taniguchi, H., Sawada, H., and Harada, Y
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 284(14) ページ: 9402-9410
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mechanism of self-sterility in a hermaphroditic chordate (2008)
  • 著者名/発表者名: Harada, Y., Takagaki, Y., Sunagawa, M., Saito, T., Yamada, L., Taniguchi, H., and Shoguchi, E., and Sawada, H
  • 雑誌名: Science 320(5875) ページ: 548-550
  • 査読あり
• [雑誌論文] Allorecognition mechanisms during ascidian fertilization (2008)
  • 著者名/発表者名: Harada, Y., and Sawada, H
  • 雑誌名: Int. J. Dev. Biol 52(5-6) ページ: 637-645
  • 査読あり
• [雑誌論文] Egg and sperm recognition systems during fertilization (2008)
  • 著者名/発表者名: Hirohashi, N., Kamei, N., Kubo, H., Sawada, H., Matsumoto, M., and Hoshi, M
  • 雑誌名: Dev. Growth Differ 50(Suppl 1) ページ: 222-238
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ascidian sperm glycosylphosphatidylinositol-anchored CRISP-like protein as a binding partner for an allorecognizable sperm receptor on the vitelline coat (2008)
  • 著者名/発表者名: Urayama, S., Harada, Y., Nakagawa, Y., Ban, S., Akasaka, M., Kawasaki, N., and Sawada, H
  • 雑誌名: J. Biol. Chem 283(31) ページ: 21725-21733
  • 査読あり
• [雑誌論文] 雌雄同体の脊索動物であるホヤの自家不稔性のメカニズム (2008)
  • 著者名/発表者名: 原田淑人、澤田均
  • 雑誌名: 細胞工学 27(9) ページ: 906-907
• [雑誌論文] Proteins interacting with the ascidian vitelline-coat sperm receptor HrVC70 as revealed by yeast two-hybrid screening (2007)
  • 著者名/発表者名: Harada, Y., and Sawada, H
  • 雑誌名: Mol. Reprod. Dev 74(9) ページ: 1478-1487
  • 査読あり
• [雑誌論文] Sperm proteasomes are responsible for the acrosome reaction and sperm penetration of the vitelline envelope during fertilization of the sea urchin Pseudocentrotus depressus (2007)
  • 著者名/発表者名: Yokota, N., and Sawada, H
  • 雑誌名: Dev. Biol 308(1) ページ: 222-231
  • 査読あり
• [雑誌論文] Effects of proteasome inhibitors on fertilization of the sea urchin Anthocidaris crassispina (2007)
  • 著者名/発表者名: Yokota, N., and Sawada, H
  • 雑誌名: Biol. Pharm. Bull 30(7) ページ: 1332-1335
  • 査読あり
• [雑誌論文] Participation of proteasome-associating complex PC500 in starfish oocyte maturation as revealed by monoclonal antibodies (2006)
  • 著者名/発表者名: Takagi Sawada, M., Tamura T., Mitani, Y., Kaya, M., Ito, G., Hashimoto, H., and Sawada, H
  • 雑誌名: Biochem. Biophys. Res. Commun 349(2) ページ: 694-700
  • 査読あり
• [学会発表] マウス受精での精子プロテアソームの機能解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 兵藤仁美、山下美鈴、河野菜摘子、康宇鎭、兼城歩、澤田均、馬場忠
  • 学会等名: 日本分子生物学会年会・日本生化学会大会・合同年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20081209-12
• [学会発表] マボヤプロテアソームの多型と細胞外ソーティング機構 (2008)
  • 著者名/発表者名: 片岡陽平、澤田均
  • 学会等名: 日本分子生物学会年会・日本生化学会大会・合同年会
  • 発表場所: 神戸
  • 年月日: 20081209-12
• [学会発表] Extracellular roles of sperm proteasomes in deuterostome fertilization (2008)
  • 著者名/発表者名: Hitoshi Sawada, Yohei Kataoka, Naoto Yokota
  • 学会等名: Zomes-V(5^<TH> International Symposium on the COP9 signalosome, Proteasome and eIF3)
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20081111-14
• [学会発表] マボヤ精子プロテアーゼAcrosinとSpermosinの相互作用分子の探索 (2008)
  • 著者名/発表者名: 赤坂茉莉、原田淑人、澤田均
  • 学会等名: 日本動物学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20080905-07
• [学会発表] カタユウレイボヤ精巣で発現しているユビキチン結合酵素E2の解析 (2008)
  • 著者名/発表者名: 横田直人、原田淑人、澤田均
  • 学会等名: 日本動物学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20080905-07
• [学会発表] カタユウレイボヤ卵黄膜のプロテオーム解析と自己非自己識別分子の同定 (2008)
  • 著者名/発表者名: 齋藤貴子、山田力志、谷口寿章、原田淑人、澤田均
  • 学会等名: 日本動物学会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20080905-07
• [学会発表] マボヤの精子-卵相互作用に関与する精子GPI結合型タンパク質HrUrabinと精子プロテアーゼHrSpermosinの相互作用に関する解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 赤坂茉莉、中川洋子、原田淑人、澤田均
  • 学会等名: 日本分子生物学会年会・日本生化学会大会・合同年会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20071211-14
• [学会発表] Etracellular ubiquitinproteasome system functioning as a vitelline-coat lysin in ascidians and sea urchins (2007)
  • 著者名/発表者名: Hitoshi Sawada
  • 学会等名: Okazaki Biology Conference, OBC 6 on "Marine Biology"
  • 発表場所: 岡崎・鳥羽
  • 年月日: 20071202-08
• [学会発表] LC/MS/MS解析によるカタユウレイボヤ卵黄膜成分の同定 (2007)
  • 著者名/発表者名: 齋藤貴子、山田力志、原田淑人、谷口寿章、澤田均
  • 学会等名: 日本動物学会
  • 発表場所: 弘前
  • 年月日: 20070920-22
• [学会発表] ウニ精子先体胞中のプロテアソームは卵黄膜ライシンとして機能している (2007)
  • 著者名/発表者名: 横田直人、澤田均
  • 学会等名: 日本動物学会
  • 発表場所: 弘前
  • 年月日: 20070920-22
• [学会発表] ホヤ類の受精における精子トリプシン様プロテアーゼの機能解析 (2007)
  • 著者名/発表者名: 赤坂茉莉、原田淑人、澤田均
  • 学会等名: 日本動物学会
  • 発表場所: 弘前
  • 年月日: 20070920-22
• [学会発表] カタユウレイボヤの自家不和合性に関与するアロ認識分子のポジショナルクローニング (2007)
  • 著者名/発表者名: 原田淑人、高垣裕平、砂川昌彦、澤田均
  • 学会等名: 日本動物学会
  • 発表場所: 弘前
  • 年月日: 20070920-22
• [学会発表] 原索動物の受精における自己非自己認識の分子基盤 (2007)
  • 著者名/発表者名: 澤田均
  • 学会等名: 日本生体防御学会学術総会
  • 発表場所: 福岡
  • 年月日: 20070726-28
• [学会発表] Vitelline coat protein CiVC100 is closely related ot self-sterility in the ascidian Ciona intestinalis (2007)
  • 著者名/発表者名: Takako Saito, Yuhei Takagaki, Yoshito Harada, Hitoshi Sawada
  • 学会等名: 4^<th> Tunicate Meeting
  • 発表場所: Villefranche-sur-Mer(France)
  • 年月日: 20070623-27
• [学会発表] Positional cloning of a gene for the allorecognition molecule during fertilization of C. intestinalis (2007)
  • 著者名/発表者名: Yoshito Harada, Yuhei Takagaki, Takako Saitoh, Masahiko Sunagawa, Hitoshi Sawada
  • 学会等名: 4^<th> Tunicate Meeting Meeting
  • 発表場所: Villefranche-sur-Mer(France)
  • 年月日: 20070623-27
• [学会発表] Sperm GPI-anchored glycoprotein HrUrabin is a binding partner for an allorecognizable egg-coat sperm-receptor HrVC70 during fertilization of the ascidian Halocynthia roretzi (2007)
  • 著者名/発表者名: Hitoshi Sawada
  • 学会等名: 4^<th> Tunicate Meeting Meeting
  • 発表場所: Villefranchesur- Mer(France)
  • 年月日: 20070623-27
• [図書] 受精におけるプロテアソーム「精子学(毛利秀雄・星元紀監修) (2006)
  • 著者名/発表者名: 澤田均
  • 総ページ数: 147-152
  • 出版者: 東京大学出版会
• [備考]
  • URL: http://www.bio.nagoya-u.ac.jp/~SugashimaMBL/Marine.html