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テロメアG-tailが、細胞の様々な機能における重要性について研究を進めるために、種々の細胞の老化におけるテロメアG-tailの短縮におけるやその機能解析を行った。
1.POT1ノックアウトマウスの解析:POT1をノックアウトした細胞では、染色体末端の融合など異常が見られた。そのときにテロメアG-tailの異常な延長がみられ、テロメア末端の維持機構においてPOT1がきわめて重要であることが明らかになった。
2.種々の細胞における細胞老化におけるテロメアG-tailの測定:血管内皮細胞HUVEC、繊維芽細胞、肝細胞などの老化細胞においてG-tailが短縮していることが明らかになった。
3.テロメラーゼによりテロメアを延長させ不死化させた細胞におけるテロメアG-tail長の測定:いずれのhTERT導入細胞で非導入の正常細胞に比べ顕著なG-tailの延長がみられた。テロメラーゼの活性化によりテロメアG-tailが延長される知見として重要である。
4.テロメラーゼでテロメアG-tailが延長された細胞の機能解析:G-tailが延長していた血管内皮細胞では、管腔形成、分化マーカーとも正常細胞に比べて更新がみられ、G-tail長の維持が細胞の機能維持にも重要であることがわかった
5.Tankyraseの各ドメインの重要性とG-tail長への影響:変異Tankyrase1によりTRF1のpoly ADPリボシル化なしにテロメア延長がおこることが明らかになった。
6.テロメラーゼ導入した乳腺上皮細胞のプロテオーム解析:hTERT導入細胞と非導入細部においてICATをもちいたプロテオーム解析を行い、テロメア延長に伴い変化するタンパク質を同定した。
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