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2006 年度 実績報告書

角膜内皮再生治療法の開発

研究課題

研究課題/領域番号 18390468
研究機関東北大学

研究代表者

西田 幸二  東北大学, 大学院医学系研究科, 教授 (40244610)

研究分担者 前田 直之  大阪大学, 大学院医学系研究科, 教授 (00273623)
田野 保雄  大阪大学, 大学院医学系研究科, 教授 (80093433)
大和 雅之  東京女子医科大学, 先端生命科学研究所, 助教授 (40267117)
横倉 俊二  東北大学, 病院・助手 (30400378)
金久保 佐和子  東北大学, 病院・医員 (90436113)
キーワード移植・再生医療 / 再生医学 / 細胞・組織 / トランスレーショナルリサーチ / 臨床
研究概要

本年度の研究実績
1.培養角膜内皮シート移植法の確立
研究用輸入ヒト強角膜片からデスメ膜ごと角膜内皮組織を採取し、温度応答性培養皿上で培養した。継代を繰り返すことで、複数の角膜内皮細胞シートを作製した。作製したヒト角膜内皮細胞シートを、水疱性角膜症モデル家兎眼への移植を行った。その結果、sham ope群と比較して、培養上皮シート移植群では、角膜の透明性が高く、角膜厚は有意に改善した。以上のことから、ヒト角膜内皮を細胞源として作製した、ヒト培養角膜内皮細胞シートは機能的に角膜内皮機能を補完できると考えられた。次に、ヒト角膜内皮細胞を単離し、非接着性培養皿上、無血清培地中でspheroid培養を行った。その結果、角膜内皮細胞から複数のsphere形成が認められた。今後は、このsphereの未分化性、増殖性にっいて検討を行う。
2.内皮細胞源の同定
神経堤細胞の特異的マーカーであるPOタンパクをCre-eGFPで標識したマウスを用いた、角膜内皮細胞源の探索を実施した。このTGマウスの眼組織のGFP発現を組織学的に解析したところ、角膜内皮は神経堤由来であることが確認でき、角膜実質、虹彩実質も同様に、神経堤由来組織であることが明らかとなった。これらの組織の中で、容易に採取可能な虹彩実質を、魚膜内皮の再生のための細胞源候補として解析を行った。その結果、虹彩実質由来細胞を単離し、spheroid培養を行うことにより、複数のsphere形成が認められた。今後はこのsphereの未分化性や多分化能について免疫染色、real-timePCR法による検討を実施する。
3.In vivo内皮細胞を増殖させる方法の確立
In vivo角膜内皮を採取し、mRNAの抽出、cDNA合成を行っている。今後、角膜内皮の増殖に関わる遺伝子の発現をreal-time PCR法により解析する予定である。

  • 研究成果

    (1件)

すべて 2007

すべて 雑誌論文 (1件)

  • [雑誌論文] N-Cadherin is expressed by putative stem/progenitor cells and melanocytes in the human limbal epithelial stem cell niche.2007

    • 著者名/発表者名
      Hayashi R, Yamato M, Sugiyama H, Sumide T, Yang J, Okano T, Tano Y, Nishida K
    • 雑誌名

      Stem Cells Feb;25 (2)

      ページ: 289-296

URL: 

公開日: 2008-05-08   更新日: 2016-04-21  

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