| 研究課題/領域番号 |
18390512
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| 研究機関 | 岡山大学 |
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研究代表者 |
松香 芳三 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教授 (90243477)
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| 研究分担者 |
前川 賢治 岡山大学, 医学部・歯学部附属病院, 講師 (20304313)
窪木 拓男 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (00225195)
完山 学 岡山大学, 医学部・歯学部附属病院, 講師 (90294420)
杉本 朋貞 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (50135729)
竹居 孝二 岡山大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (40322226)
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| キーワード | 三叉神経痛 / 神経細胞 / 神経伝達物質 / 神経ペプチド / 小胞 / 遊離 / 取り込み |
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| 研究概要 |
1:慢性的な三叉神経刺激モデルにおける知覚閾値変化
三叉神経刺激モデルラット(Sprague-Dawley、250〜300g)の顔面部知覚閾値を計測した。ラット胴体を固定器(Lomir Biomedical)に固定し、頭部のみが容易に動くようにしておき、眼下窩神経支配部位の皮膚を知覚閾値計(IITC)で押えることにより閾値を計測した。数日間のベースラインデータを計測した後、麻酔下(ペントバルビタール50mg/kg)で、眼下窩神経を3-0の絹糸2本でゆるく結紮した。その結果、眼窩下神経結紮側ではコントロール側と比較して、知覚閾値が低下することが明らかになった。これは、三叉神経痛患者の臨床症状と類似しており、三叉神経痛モデルが作成できたことを示している。
2:三叉神経節細胞での神経伝達物質の取り込み・遊離の観察および神経ペプチドの有無により比較
ペントバルビタール麻酔下(75mg/kg)で、断頭・除脳後、三叉神経節を摘出し、コラーゲナーゼおよびトリプシンを用いて神経細胞を単離した。単離した神経節細胞をpoly-D-lysin処理を行ったカバーガラス上で培養した。三叉神経節細胞を、神経ペプチドを有するIB4(-)細胞と有していないIB4(+)細胞に分類して、FM4-64を投与し、神経伝達物質の遊離・取り込みの状態を観察した。その結果、神経ペプチドを有していないIB4(+)細胞では伝達物質の遊離・取り込みが速く、再取り込みが生じていることが推測された。
3:今後の研究計画
まず、三叉神経痛モデルから採取した三叉神経節細胞で,神経伝達物質の遊離・取り込みの変化を観察する。その後、神経伝達物質の遊離を抑制する薬剤を投与することにより、三叉神経刺激モデルラットの閾値の変化を観察する。また、その薬剤を投与することにより、三叉神経節細胞における伝達物質の遊離・取り込みの変化を観察する。
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