| 研究概要 |
タンパク質の直接検出型センサーの開発を目指して,分極性油水界面でのアニオン性界面活性剤によるタンパク質の促進移動の反応機構の解明を行った。まず,申請前に行ったアニオン性界面活性剤Aerosol-OT(AOT)による検討結果を踏まえ,別の構造のアニオン性界面活性剤dinonylnaphthalenesulfonate(DNNS)を用いてシトクロムc(Cyt c)の1,2-ジクロロエタン(DCE)/水(W)界面での促進移動の反応機構を検討した。DNNSは,先にAmemiyaらによって,そのDCE/W界面での小型タンパク質(プロタミン)の移動の促進効果が報告されている。しかし,その反応機構は,我々がAOTによって見出した逆ミセル形成によるものではなく,一般的な錯形成反応に基づくものであった。今回の我々のボルタンメトリーの研究により,DNNSの場合もpH3.5付近の酸性条件下でAOTと同様にCyt cの促進移動(ただし逆ミセル形成ではない)が観察され,また,pH7付近の中性条件下ではDNNSによる空の逆ミセルへのCyt cの取り込みが確認された。
さらに,電気化学的制御を行わない油水界面を用いて,通常のCyt cの逆ミセル抽出反応における界面電位差の役割を,抽出過程での界面電位差の変化を測定して検討した。その結果,Cyt cの油相への抽出には,分極性界面を用いたボルタンメトリーの場合と同様に,界面活性剤による空の逆ミセルが形成される電位が界面にかかっていることが必要であることが分った。ただし,界面活性剤の濃度とCyt cの抽出率の関係を調べたところ,タンパク質の逆ミセル抽出には一定の界面活性剤濃度が必要であり,界面張力が十分小さくなることも必要があることが示唆された。
以上の基礎的検討を踏まえて,次年度においてタンパク質の直接検出型センサーの開発を行う予定である。
|
