研究課題
基盤研究(C)
コンデンシンは、SMC2/SMC4の二つのSMC ATPaseタンパク質と三つのnon-SMCタンパク質からなるタンパク質複合体で、M期の染色体凝縮に必須の因子である。近年、修復、チェックポイントの活性化、転写制御にもこの酵素が関与することが報告されている。コンデンシンは、in vitroでATP依存的にDNAに正の超らせんを導入する活性を持つ。我々は、コンデンシンが間期においてM期とは別の部位がCK2によりリン酸化されていることを見いだした。M期でのリン酸化とは逆に、間期リン酸化はコンデンシンの活性を著しく抑制した。細胞周期における、このCK2による抑制的なリン酸化の制御を調べたところ、M期染色体上でCK2部位のリン酸化レベルが著しく低下していた。さらに、ツメガエルの卵抽出液の系において、コンデンシンのCK2コンセンサス部位のリン酸化レベルを上昇させると、染色体の凝縮は阻害された。これらの結果から、細胞周期においてコンデンシンの機能は、M期キナーゼCdc2だけでなく、CK2によっても制御されていることが示唆された。また、コンデンシンの機能をさらに詳細に解析するために、昆虫細胞でコンデンシンの組換タンパク質を発現させ精製した。この組換えタンパク質は、内在性のコンデンシンを相補した。今後は、ATP結合部位やリン酸化部位のアミノ酸残基を置換した、コンデンシンの変異体を作製して、その機能を解析する予定である。
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