研究概要 |
リンドウの花色変異体及び懸濁培養細胞を用いて新規トランスポゾンの同定、解析試験を行い、以下の成果を得た。1.昨年度、ピンク花リンドウのフラボノイド3',5'水酸化酵素(F3'5'H)遺伝子の第1イントロン内に322bpのDNA型トランスポゾン配列の特徴を有する挿入断片を同定した。本年度、発現解析を行った結果、本ピンク花リンドウにおいては花弁におけるF3'5'H遺伝子の発現量が減少しており、本配列の挿入により変異が引き起こされたものと推察された。また、RT-PCR法によるF3'5'H遺伝子転写産物の解析結果から、トランスポゾン配列の部分断片を含む異常なスプライシング産物の蓄積が確認され、本トランスポゾンの挿入が直接ピンク花化に関わっていることが推察された。2.昨年度、白花リンドウにおいて花弁着色に関わると推定されるMyb遺伝子の第2エキソンに271bpのDNA型トランスポゾン挿入断片を同定した。本年度、他の白花リンドウ品種において、本Myb遺伝子のゲノム構造を解析したところ、新たに異なるDNA型トランスポゾン様配列の挿入が確認された。3.リンドウ懸濁培養細胞から新規トランスポゾンの単離を試み、hAT、En/Spm型トランスポゾンについて、タンパク質をコードする遺伝子断片をそれぞれ2種類ずつ単離した。また、RNA型についても1種類のLTR型レトロトランスポゾンを同定した。5-azadC、サリチル酸、ジャスモン酸による誘導性を解析した結果、一部で転写誘導が認められた。今後、同定した誘導条件を用いてトランスポゾンディスプレイ法等により、転移活性を解析する予定である。 以上、今回の解析結果から、リンドウにおいて新規トランスポゾンが複数単離された。今後、これらトランスポゾンの解析を進めることにより、植物におけるトランスポゾンの進化、転位機構が明らかにできると考えられる。
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